Orexin(ORX)是1998年發(fā)現(xiàn)的一種來自側(cè)下丘腦區(qū)(LHA)具有神經(jīng)興奮作用的多肽。Orexin系統(tǒng)包括來自同一基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的二個單體(ORX-A和B)及其對應的兩個G蛋白偶聯(lián)受體(OX1R和OX2R)。大量證據(jù)發(fā)現(xiàn)側(cè)下丘腦orexin系統(tǒng)對覺醒-睡眠周期的調(diào)控起關(guān)鍵作用。目前對orexin促覺醒作用的研究主要集中于皮層下(腦干、下丘腦內(nèi))的覺醒睡眠調(diào)節(jié)區(qū)如藍斑核、背縫核、結(jié)節(jié)狀乳頭體核、及腦橋腳核等結(jié)構(gòu)，而對側(cè)下丘腦的orexin與皮層本身的關(guān)系研究極少。形態(tài)學證據(jù)顯示側(cè)下丘腦的orexin纖維和受體廣泛分布于大腦皮層尤其是額葉皮質(zhì)的Ⅴ、Ⅵ層。臨床研究發(fā)現(xiàn)發(fā)作性睡病患者大腦皮質(zhì)的orexin纖維有選擇性的丟失。迄今為止，側(cè)下丘腦的orexin是否具有直接興奮大腦皮質(zhì)功能未見文獻報道。 本實驗以急性分離Wistar大鼠額葉皮質(zhì)(frontal cortex, FCX)錐體細胞為研究對象，采用膜片鉗全細胞記錄技術(shù)，觀察了FCX錐體細胞的基本電生理特性；orexin A對其興奮性的影響及其離子機制；orexin A對谷氨酸和GABA介導的興奮作用的影響。藉此探討or...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1額葉皮質(zhì)（FCX）的部位及取材位置（方框內(nèi)）

、AP5(50mM)、和CNQX(10me，0.002761gCNOX，0.009855gml雙蒸水中，0℃以下保存?zhèn)溆梅蛛x取腦，置入混和氣(95%O2，5%C端(2～4mm)按冠狀面切成約30ACSF中孵育1h以上；在1g次，在深色背景下分出額葉皮....

圖3細胞封接過程中測試方波的變化過程：由上到下為記錄電極分別在溶液中、接近細胞、進一步靠近細胞、形成giga封接及破膜后形成全細胞膜片鉗的波形

則可打破電極尖端的細胞膜，使細胞內(nèi)液與電極內(nèi)液相通，形成所謂的“全細胞膜片”(圖3“gowholecell”)，這時記錄方式即是全細胞記錄。圖2膜片鉗記錄系統(tǒng)示意圖灌流槽

圖5在系列由超極化到去極化的躍階電流（-60⁺40pA,step=10，時長100ms）

第三軍醫(yī)大學碩士學位論文記錄方式下，0.1mM的GABA使細胞膜發(fā)生超極化伴自發(fā)性)。加藥裝置的可靠性，排除因其它因素對神經(jīng)元造成假陽性結(jié)果鹽水或正常ACSF以作對照，結(jié)果膜電位和放電頻率均未見

圖6在系列由超極化到去極化的躍階電流（-60⁺40pA,step=10，時長200ms）刺激下，F(xiàn)CX錐體細胞產(chǎn)生的動作電位數(shù)目增多

5在系列由超極化到去極化的躍階電流(-60⁺40pA,step=10，時長100ms刺激下，F(xiàn)CX錐體細胞產(chǎn)生動作電位

本文編號：4012524