肺血管收縮反應(yīng)增強和肺血管結(jié)構(gòu)重組是缺氧性肺動脈高壓（HPH）的兩個主要的病理生理特點，也是HPH發(fā)生和發(fā)展的重要基礎(chǔ)。越來越多的研究表明HPH是一種結(jié)構(gòu)性疾病，即肺血管結(jié)構(gòu)重組對HPH的發(fā)病機制具有更重要的意義。在慢性肺泡缺氧條件下，肺循環(huán)的所有實質(zhì)都存在結(jié)構(gòu)變化，而且這種變化存在于動脈壁的所有結(jié)構(gòu)層，這些變化包括a)血管內(nèi)膜出現(xiàn)縱形的平滑�。籦)外膜內(nèi)大量增生的膠原和彈性蛋白的異常堆積；c)肺泡內(nèi)無肌性血管出現(xiàn)肌化和中層平滑肌細胞的肥大和增生。作為肺血管收縮反應(yīng)的主要承擔者和血管結(jié)構(gòu)重組的重要參與者，肺動脈平滑肌細胞（PASMC）的分化，增殖，遷移以及膠原合成的變化，對缺氧性肺血管結(jié)構(gòu)重組具有非常重要的意義，但目前對其細胞分子生物學機制還了解不多。 本研究在國內(nèi)外首次提出并證明PASMC可以直接感受缺氧，缺氧可誘導PASMC進入分裂周期，促進PASMC的DNA合成和細胞的分裂增殖，增強PASMC對內(nèi)皮素-1（ET-1）和血小板衍生生長因子（PDGF）的增殖反應(yīng)和遷移反應(yīng)，并且可促進PASMC的膠原合成，同時缺氧減弱了一氧化氮（NO）供應(yīng)劑硝普鈉（SNP）及...

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
略語表
中文摘要
英文摘要
Ⅰ.前言
Ⅱ.材料與方法
    一.材料
        1.主要儀器、設(shè)備
        2.主要試劑
    二.方法
        1.主要溶液配制
        2.主要實驗方法
            (1) 減壓缺氧大鼠模型的建立
            (2) 組織制備
            (3) 血管收縮和舒張反應(yīng)的生物測定法
            (4) 肺腺泡內(nèi)動脈超微結(jié)構(gòu)觀察
            (5) 細胞培養(yǎng)
            (6) 平滑肌細胞鑒定
            (7) 細胞缺氧模型
            (8) ³H-胸腺嘧啶核苷(³H-TdR)參入
            (9) 細胞趨化反應(yīng)
            (10) 美藍染色分析
            (11) 流式細胞計測定細胞中DNA含量
            (12) ⁴⁵Ca²⁺跨膜內(nèi)流測定
            (13) 胃蛋白酶消化法測定細胞膠原合成
            (14) PASMC條件培養(yǎng)液(PASMC-CM)的制備
            (15) PASMC細胞內(nèi)cGMP放免測定
            (16) PASMC培養(yǎng)液中ET-1放免測定
            (17) cDNA探針的制備
            (18) cDNA探針的標記
            (19) 組織及細胞總RNA的提取
            (20) Nor thern印跡雜交
            (21) 斑點雜交
            (22) RT-PCR
            (23) 統(tǒng)計學處理
Ⅲ.實驗結(jié)果
    一.缺氧對PASMC增殖、遷移和膠原合成的影響
        1.缺氧對PASMC增殖的影響
        2.缺氧促進PASMC的趨化反應(yīng)
        3.缺氧對PASMC膠原合成的影響
    二.EDCF／ET-1和EDRF／NO對PASMC作用的多能性
        1.ET-1和NO對大鼠離體肺動脈張力的影響及缺氧可特異地破壞EDCF／ET-1和EDRF／NO作用的動態(tài)平衡
        2.ET-1和NO對PASMC增殖的影響
            (1) ET-1對PASMC增殖的影響
            (2) NO對PASMC增殖的影響
        3.PDGF、ET-1、NO和ANP對PASMC遷移的影響
            (1) PDGF誘導PASMC的趨化反應(yīng)
            (2) ET-1誘導PASMC的趨化反應(yīng)
            (3) NO和ANP對PDGF誘導的PASMC趨化反應(yīng)的抑制作用
        4.ET-1和NO對PASMC膠原合成的影響
Ⅳ.討論
    一.缺氧對PASMC的直接作用在HPH發(fā)病機制中的作用
    二.EDCF／ET-1和EDRF／NO對血管作用的多功能研究
    三.肺血管中EDCF／ET-1與EDRF／NO失衡在缺氧性肺血管收縮反應(yīng)增強和結(jié)構(gòu)重組中的作用
    四.結(jié)論
Ⅴ.參考文獻
Ⅵ.文獻綜述
簡歷
致謝



本文編號：4011014