發(fā)布時(shí)間：2023-12-12 19:46

　　背景/目的：艱難梭菌（Clostridium difficile）是抗生素相關(guān)性腹瀉 （AAD）和偽膜性腸炎（PMC）的主要致病因子。此類疾病的發(fā)生與抗生 素的廣泛應(yīng)用和抗腫瘤的化療密切相關(guān)�？股鼗蚩鼓[瘤藥物破壞正常 腸道菌群的微生態(tài)平衡，內(nèi)源性或外源性艱難梭菌產(chǎn)毒株在腸道定植， 釋放毒素A和毒素B，造成腸道粘膜損害及炎癥。AAD的治療包括停用 抗生素及補(bǔ)液，稍重者可口服甲硝唑，而嚴(yán)重感染如偽膜性腸炎需服用 萬古霉素治療。但由于此種疾病較高的復(fù)發(fā)率（大于25％）以及逐漸增 多的發(fā)病率和致死率，進(jìn)行免疫防治和基因疫苗治療的研究十分必要。 另外對于該菌感染，現(xiàn)檢測手段廢時(shí)費(fèi)力，而基因探針診斷的優(yōu)點(diǎn)顯而 易見。該菌產(chǎn)生的毒素A既是腸毒素，又是一種細(xì)胞毒素，而毒素B是 在毒素A損傷粘膜細(xì)胞的基礎(chǔ)上產(chǎn)生作用，因此毒素A成為研究重點(diǎn)。 編碼毒素A的基因由八千多個(gè)堿基構(gòu)成，在其近3’端有大量的重復(fù)單位， 已證明為功能區(qū)域（編碼粘合蛋白）。本實(shí)驗(yàn)的目的在于從毒素A的功能 區(qū)域進(jìn)行基因片斷的克隆并序列分析以作為進(jìn)一步治療研究的基礎(chǔ)以及 探討其臨床快速檢測的意義。 方法：（1）、收集臨床腹瀉病人...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 艱難梭菌的分離培養(yǎng)和生物學(xué)特性
    引言
    材料和方法
    結(jié)果
        一、 培養(yǎng)和涂片鏡檢
        二、 細(xì)菌的生化鑒定
        三、 傳代、保種和復(fù)蘇
    討 論
第二部分 毒素A基因3'末端重復(fù)區(qū)域基因片斷的克隆
    引言
    材料和方法
    結(jié)果
        一、 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳分析
        二、 基因片斷測序及序列分析
        三、 蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的預(yù)測和分析
    討 論
總 結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致 謝



本文編號(hào)：3873527