甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein，AFP)是個70kDa的糖蛋白，在胎兒期由胎肝大量合成，在出生后則表達急劇下降。由于甲胎蛋白在原發(fā)性肝癌中也有高表達，既往多將甲胎蛋白用于肝癌的早期診斷和病情監(jiān)測。最近研究表明，甲胎蛋白有著復(fù)雜的生物學(xué)功能，具有既能抑制免疫功能間接促進腫瘤細胞生長又能直接促進腫瘤細胞生長的雙重作用。同時，甲胎蛋白多肽片斷在和MHC分子結(jié)合后能被細胞毒性T淋巴細胞(CTL)所識別。因此，作為原發(fā)性肝癌的腫瘤相關(guān)性抗原(TAA)，甲胎蛋白完全有可能充當(dāng)肝癌免疫治療的靶分子。但從人血中提取純化甲胎蛋白的量小且成本昂貴。本實驗通過大腸桿菌等基因工程菌獲得重組甲胎蛋白，為進一步研究開發(fā)甲胎蛋白抗腫瘤奠定了基礎(chǔ)。 1．人AFP基因的獲取 用Trizol從人胎肝組織提取mRNA，再逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。設(shè)計并合成AFP1、AFP2、AFP3三對基因引物，兩端設(shè)計與載體多克隆位點匹配的酶切位點BamH Ⅰ、Hind Ⅲ，以cDNA為模板分別作PCR，分別獲取AFP1、AFP2、AFP3基因片段。各PCR產(chǎn)物長度：AFP1為588bp；AFP2為678bp；AF...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 論文正文 人甲胎蛋白基因原核克隆和表達
    前言
    實驗材料與設(shè)備
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
四、 綜述 腫瘤疫苗臨床研究進展
五、 致謝



本文編號：3797450