為了初步探索發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒（Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV）核蛋白（nucleoprotein,NP）對宿主細(xì)胞免疫功能的影響。將SFTSV NP和NSs蛋白的編碼基因插入真核表達(dá)載體VR1012中,通過免疫共沉淀（IP）、SDS-PAGE、質(zhì)譜檢測及蛋白質(zhì)免疫印跡等方法尋找宿主細(xì)胞中與NP相互作用,同時又與免疫功能有關(guān)的蛋白質(zhì)分子,并利用細(xì)胞免疫熒光方法檢測SFTSV NP與該分子在細(xì)胞中的共定位情況。IP和質(zhì)譜檢測結(jié)果顯示NP能與免疫功能相關(guān)的60kD SSA/Ro蛋白發(fā)生特異性結(jié)合,細(xì)胞免疫熒光試驗進(jìn)一步顯示NP與60kD SSA/Ro蛋白在細(xì)胞質(zhì)中存在共定位。提示SFTSV可能通過其核蛋白與免疫相關(guān)分子60kD SSA/Ro蛋白發(fā)生特異性結(jié)合,從而引起機(jī)體一系列的免疫反應(yīng)和臨床癥狀。 

【文章來源】：病毒學(xué)報. 2014,30(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1細(xì)胞、病毒及試劑
    2質(zhì)�？寺�
    3質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞和免疫共沉淀試驗
    4 SDS-PAGE、考馬斯亮藍(lán)染色及Western blot檢測
    5細(xì)胞免疫熒光檢測
結(jié)果
    1 SFTSV核蛋白NP能與細(xì)胞自身的60KD SSA/Ro蛋白結(jié)合
    2 Western blot驗證SFTSV NP與60kD SSA/Ro蛋白的相互作用
    3 SFTSV NP與60kD SSA/Ro蛋白的細(xì)胞共定位
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)研究[J]. 盧靜,李川,張福順,蕪為,張全福,張黎,王濤,王芹,仇佩虹,梁米芳,李德新.  病毒學(xué)報. 2011(06)



本文編號：3473739