目的 應用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE）和隨機擴增多態(tài)性DNA（RAPD）技術獲取安徽省三種常見蜚蠊的可溶性蛋白質區(qū)帶和DNA指紋圖譜，對三種常見蜚蠊的可溶性蛋白質和基因組DNA多態(tài)性進行分析研究，為蜚蠊分類提供科學依據(jù)。方法 采集安徽省三種常見蜚蠊黑胸大蠊、美洲大蠊、德國小蠊成蟲標本，進行形態(tài)學的分析鑒定。首先應用凍融勻漿法制備這三種蜚蠊的可溶性蛋白質勻漿液，進行十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE），獲取三種常見蜚蠊的可溶性蛋白質區(qū)帶，用考馬斯亮藍G-250染色后，觀察和計算出各蜚蠊主要蛋白質區(qū)帶的分子量。然后，提取三種蜚蠊的基因組DNA，進行鑒定及定量分析。確定隨機擴增多態(tài)性DNA（RAPD）反應總體積、反應條件。選取5條不同的隨機排列堿基順序的多聚核苷酸單鏈為引物，進行RAPD-PCR擴增反應。將擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳，獲得這三種蜚蠊的DNA圖譜，計算出三種蜚蠊種間的遺傳距離。最后對這三種蜚蠊可溶性蛋白質區(qū)帶和基因組DNA多態(tài)性分析和研究。結果 用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE）進行研究顯示：黑胸大蠊（P.f.）... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

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【學位級別】：碩士

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安徽省三種常見蜚蠊可溶性蛋白質和基因組DNA的分析
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
            2.2.1 SDS-PAGE方法
                2.2.1.1 取蜚蠊成蟲的胸段制備蛋白質勻漿
                2.2.1.2 SDS-PAGE電泳
                2.2.1.3 數(shù)據(jù)處理
            2.2.2 RAPD方法
                2.2.2.1 取蜚蠊成蟲的胸段提取基因組DNA
                2.2.2.2 DNA的純度及定量分析
                2.2.2.3 基因組DNA擴增
                2.2.2.4 基因組DNA擴增產物的檢測
                2.2.2.5 數(shù)據(jù)處理
    3 結 果
        3.1 三種蜚蠊可溶性蛋白質SDS-PAGE結果
        3.2 三種蜚蠊基因組DNA隨機擴增（RAPD）結果
    4 討 論
        4.1 關于SDS-PAGE實驗結果的討論
        4.2 關于RAPD實驗結果的討論
        4.3 關于實驗條件的分析討論
            4.3.1 蜚蠊的取材
                4.3.1.1 不同蟲期標本的選擇
                4.3.1.2 不同保存方法的影響
            4.3.2 SDS-PAGE和RAPD實驗條件討論
                4.3.2.1 關于RAPD實驗條件討論
                4.3.2.2 關于SDS-PAGE實驗條件討論
        4.4 關于SDS-PAGE和RAPD用于昆蟲分類的研究
        4.5 本研究尚存在的不足和進一步展望
    5 小結
參考文獻
附 錄
致 謝
綜 述



本文編號：3351031