真核細胞起始因子5A（eukaryotic initiation factor 5A，eIF5A）是自然界中唯一含有特殊氨基酸hypusine的蛋白質(zhì)，最初由于被發(fā)現(xiàn)參與了蛋白質(zhì)的翻譯啟始過程而命名。事實上，eIF5A對于真核細胞大多數(shù)蛋白質(zhì)的合成并非必需，而僅參與部分蛋白質(zhì)的合成。隨后的研究進一步發(fā)現(xiàn)，eIF5A還是HIV-1反式激活蛋白Rev發(fā)揮作用所必需的胞內(nèi)協(xié)同因子，并參與mRNA的胞核外運，表明它還有其它的功能。 近年來研究進一步發(fā)現(xiàn)，eIF5A還與細胞凋亡的發(fā)生密切相關(guān)，但詳細機制并不清楚。我們實驗室在阻斷泛素通路誘發(fā)白血病細胞凋亡的蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，發(fā)現(xiàn)eIF5A參與了上述凋亡調(diào)控，特別是抑制eIF5A的hypusine翻譯后修飾能夠誘發(fā)白血病細胞凋亡（靳寶鋒等．Oncogene，2003，22：4819-4830）。本文為進一步揭示eIF5A在細胞凋亡過程中的作用，應(yīng)用酵母雙雜交技術(shù)對eIF5A相互作用蛋白質(zhì)進行了篩選并對其功能進行了初步研究。 結(jié)果顯示，我們首次發(fā)現(xiàn)并系統(tǒng)證明了eIF5A與syntenin之間能夠發(fā)生特異性的相互作用，并具有重要的功能。在酵... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

誘餌表達載體的酶切鑒定MDL2000..

Westernblot分析EFP、eifsa的表達

DBD一e1fsa細胞中自身轉(zhuǎn)錄激活活性的測定鏗法，把pGBKT7一EFP、pGBKT7一eifsa以及空載胞AH109后，最終涂在兩種氨基酸缺陷型(一TrP長。最終的分析結(jié)果是，無論是空載體、EFP還是激活活性�？梢赃M行下一步的篩選工作(圖略)。Gal的培養(yǎng)板上變藍的菌落，視為陽性(圖3)。以EFP為誘餌時，從1.75x106個的克隆中篩選性克隆;以eifsa為誘餌時，從1.Oxl06個的克隆中篩選性克隆;


本文編號：3237734