人源抗-HBs Fab表達系統(tǒng)的轉(zhuǎn)換與制備研究
發(fā)布時間:2021-04-28 21:54
隨著重組抗體技術的發(fā)展,人鼠嵌合抗體、人源化抗體在臨床的使用已初顯成效。治療用抗體的核心問題是抗體蛋白的完全人源化,以消除用于人體時產(chǎn)生的HAMA反應或其他并發(fā)癥,而完全的人源抗體完全避免了鼠源成分,是未來臨床應用的必要形式。人源抗體得以有效應用的關鍵在于其低免疫原性以及保留了對抗原的特異性結(jié)合的生物學特性,正成為當前研究的熱點。 以噬菌體表面呈現(xiàn)技術制備抗體片段,如Fabs或單鏈Fv,是1990年由McCafferty等最先報道的。通常利用各種噬菌體載體、基因融合技術,連同PCR擴增技術,建立組合抗體文庫,再利用供者文庫建立針對某一特定抗原的子文庫,是近年來形成的最新方法,從而回避了雜交瘤技術和免疫。 人源抗體制備的瓶頸是獲得高表達、高產(chǎn)量、高活性抗體。前期的研究表明,以pComb3為載體的抗體片段表達無法避免較高的基礎表達,難以達到上述的理想制備。本課題引入了一個新的策略,即以pBAD/gⅢ為載體重新克隆抗—HBs Fab基因。這個系統(tǒng)的主要特點在于①在無誘導劑的條件下,表達水平很低,②存在誘導劑的情況下,獲得適度地高表達水平,③調(diào)節(jié)表達地誘導劑濃度范圍很寬,④表達系統(tǒng)...
【文章來源】:中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
摘要
中文摘要
英文摘要
前言
論文
第一部分 人源生物工程抗-HBsFab的克隆與表達
材料與方法
結(jié)果
討論
第二部分 表達和純化人源抗-HBsFab的條件選擇
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]人源性抗HBsAg單克隆抗體Fab片段的制備及其純化[J]. 范列英,韓煥興,胡東平,孔憲濤. 第二軍醫(yī)大學學報. 1997(04)
[2]人源抗HBsAg單克隆抗體組合文庫的建立[J]. 韓煥興,孔憲濤. 中國免疫學雜志. 1996(05)
本文編號:3166239
【文章來源】:中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
摘要
中文摘要
英文摘要
前言
論文
第一部分 人源生物工程抗-HBsFab的克隆與表達
材料與方法
結(jié)果
討論
第二部分 表達和純化人源抗-HBsFab的條件選擇
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]人源性抗HBsAg單克隆抗體Fab片段的制備及其純化[J]. 范列英,韓煥興,胡東平,孔憲濤. 第二軍醫(yī)大學學報. 1997(04)
[2]人源抗HBsAg單克隆抗體組合文庫的建立[J]. 韓煥興,孔憲濤. 中國免疫學雜志. 1996(05)
本文編號:3166239
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