目的在已建立的HCMV先天性中樞神經(jīng)系統(tǒng)潛伏感染Balb/c老年小鼠模型的基礎(chǔ)上,評(píng)價(jià)老年模型小鼠的免疫風(fēng)險(xiǎn)表型（IRP）,同時(shí)觀察大腦皮質(zhì)的阿爾茨海默病（AD）樣病理改變,初步探討HCMV先天性潛伏感染老年Balb/c小鼠免疫功能改變與AD發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。方法隨機(jī)選取HCMV先天性潛伏感染組（A組）、HCMV先天性潛伏感染再激活組（B組）及HF細(xì)胞對(duì)照組（C組）24²6月齡老年雌性小鼠各6只,眼眶取血并引頸處死后,無菌取小鼠大腦皮質(zhì)和脾臟,分別作如下試驗(yàn):（1）體外細(xì)胞共培養(yǎng)病毒分離試驗(yàn)、PCR及原位雜交檢測(cè)HCMV UL83 DNA、RT-PCR檢測(cè)HCMV UL83 mRNA、間接免疫熒光檢測(cè)HCMV pp65等確定三組小鼠腦組織中HCMV感染及其感染狀態(tài);（2）小鼠免疫狀態(tài)檢測(cè):間接ELISA檢測(cè)小鼠血清中的HCMVIgG、IgM抗體水平,流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)外周血細(xì)胞和脾臟細(xì)胞懸液中CD3+/CD4+/CD8+ T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量;（3）大腦皮質(zhì)AD相關(guān)病理學(xué)檢測(cè):HE染色檢測(cè)小鼠大腦皮質(zhì)構(gòu)筑和病理改變;剛果紅染色檢測(cè)大腦皮質(zhì)中的淀粉樣斑塊;鍍銀染色檢查... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

共培養(yǎng)病毒分離試驗(yàn)HF細(xì)胞CPE改變(×200)

圖 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 瓊脂糖凝膠電泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCR:DL-2000 Marke； 1:陽性對(duì)照；2:陰性對(duì)照 3:A 組小鼠；4:B 組小鼠；5:C 組小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C;接免疫熒光檢測(cè) pp65 抗原結(jié)果HCMV pp65多克隆抗體進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)各組細(xì)胞爬片pp65抗原的表達(dá)情在 A、B 兩組的 HF 細(xì)胞漿內(nèi)檢測(cè)到蘋果綠色陽性信號(hào)（圖 3-Ⅱ）；C 組未檢特異性蘋果綠色熒光陽性信號(hào)（圖 3-Ⅰ）。

圖 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 瓊脂糖凝膠電泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCRM:DL-2000 Marke； 1:陽性對(duì)照；2:陰性對(duì)照 3:A 組小鼠；4:B 組小鼠；5:C 組小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C; 間接免疫熒光檢測(cè) pp65 抗原結(jié)果用HCMV pp65多克隆抗體進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)各組細(xì)胞爬片pp65抗原的表達(dá)情在 A、B 兩組的 HF 細(xì)胞漿內(nèi)檢測(cè)到蘋果綠色陽性信號(hào)（圖 3-Ⅱ）；C 組未檢特異性蘋果綠色熒光陽性信號(hào)（圖 3-Ⅰ）。250100005000PCR RT-PCR

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3103518