目的制備戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）ORF2抗原,并對(duì)其免疫原性進(jìn)行分析。方法通過(guò)基因合成獲得HEV ORF2目的基因,構(gòu)建重組桿狀病毒,并在sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞中優(yōu)化表達(dá);采用超聲、硫酸銨沉淀及層析純化HEV ORF2蛋白,免疫小鼠分析其免疫原性。結(jié)果制備的重組桿狀病毒滴度為1×108 PFU/m L;重組蛋白表達(dá)條件MOI為1,收獲時(shí)間為5 d時(shí),表達(dá)量最高為20 mg/L;通過(guò)純化獲得HEV ORF2蛋白純度> 95%;其疫苗組血清特異性抗體效價(jià)與PBS對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0. 05）。結(jié)論成功表達(dá)并純化了HEV ORF2蛋白,該純化方法可獲得純度較高的目的蛋白,且制備的HEV ORF2蛋白具有很好的免疫原性,可用于制備和開(kāi)發(fā)預(yù)防性疫苗。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2019年06期

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 抗體、細(xì)胞及質(zhì)粒
    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.3 主要試劑及儀器
    1.4 目的基因獲取及重組桿粒的構(gòu)建
    1.5 重組桿毒的制備
    1.6 HEV ORF2表達(dá)條件的優(yōu)化
    1.7 HEV ORF2蛋白的表達(dá)及純化
    1.8 HEV ORF2蛋白免疫原性檢測(cè)
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 重組桿粒測(cè)序
    2.2 重組桿病毒毒滴度
    2.3 HEV ORF2蛋白表達(dá)參數(shù)
    2.4 病毒感染后細(xì)胞濃度及活率的變化
    2.5 HEV ORF2蛋白純化結(jié)果
    2.6 HEV ORF2免疫原性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Chronic hepatitis E: A brief review[J]. Arvind R Murali,Vikram Kotwal,Saurabh Chawla.  World Journal of Hepatology. 2015(19)



本文編號(hào)：2951744