目的:探索02F04誘導(dǎo)TSLP表達是否通過核受體介導(dǎo)。方法:一系列濃度的6種核受體,包括視黃酸受體(RAR)、維甲酸X受體(RXR)、過氧化物酶體增生物激活受體(PPAR)、維生素D受體(VDR)、糖皮質(zhì)激素受體(GR)和肝X受體(LXR)的激動劑和抑制劑,單用或者與10μmol/L 02F04聯(lián)合刺激PAM212細胞24 h后,ELISA法測定培養(yǎng)上清中TSLP的蛋白水平,MTT法檢測PAM212細胞的存活率。10μmol/L 02F04刺激PAM212細胞4、8、12或24 h,實時熒光定量PCR反應(yīng)測定細胞中相應(yīng)核受體靶向基因的表達。結(jié)果:VDR激動劑不能增加PAM212細胞中TSLP的表達。02F04不能誘導(dǎo)RAR、RXR和PPAR靶向基因的表達,且RARα、PPARγ和PPARδ的激動劑及抑制劑單用或與02F04合用后均不影響TSLP的產(chǎn)生; RARγ、RXR和GR激動劑可抑制細胞基本水平及02F04誘導(dǎo)水平的TSLP產(chǎn)生,而抑制劑未呈現(xiàn)出相反的結(jié)果。02F04可激活LXR并增加靶向基因ABCA1的表達,但LXR激動劑不能誘導(dǎo)TSLP產(chǎn)生,LXR抑制劑也不能抑制02F04誘... 

【文章來源】：中國免疫學(xué)雜志. 2019年11期 第1289-1294頁 北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

F04和22(Ｒ)-羥基膽固醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig．1Chemicalstructuresof02F04and22(Ｒ)-hydroxy-

時，TSLP的蛋白水平如圖2A所示。02F04能顯著刺激PAM212細胞中TSLP表達的上調(diào)，且在0.3～30μmol/L范圍內(nèi)，隨著02F04刺激濃度的增加，PAM212細胞中TSLP的產(chǎn)生增多。然而，當(dāng)02F04的濃度為30μmol/L時，細胞存活率急劇降低至55.8%。因此，后續(xù)實驗選擇02F04的濃度為10μmol/L進行進一步考察。圖2B表明隨著02F04刺激時間的延長，PAM212細胞的TSLP基因表達量也在不斷增加，24h與對照組比已有顯著性差異(P＜0.001)，48h表達進一步增加。2.2PAM212細胞中TSLP的表達與VDＲ無關(guān)VDＲ激動劑MC903在0.3～10μmol/L范圍內(nèi)刺激圖202F04對PAM212細胞TSLP表達的影響Fig．2Effectof02F04onTSLPexpressioninPAM212cellsNote:*.P＜0.05，＊＊.P＜0.01，＊＊＊.P＜0.001vsthecorrespondingcontrol;A.■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability;B.Valuesinthecontrolgroupwithtreatmentfor8hweresetto1.0.圖3VDＲ激動劑不能誘導(dǎo)PAM212細胞中TSLP的表達Fig．3TSLPexpressioninPAM212cellswasnotinducedbyagonistofVDＲNote:■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability.翁琰等甾體衍生物02F04通過非核受體上調(diào)PAM212細胞胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素的研究第11期·1921·

mol/L進行進一步考察。圖2B表明隨著02F04刺激時間的延長，PAM212細胞的TSLP基因表達量也在不斷增加，24h與對照組比已有顯著性差異(P＜0.001)，48h表達進一步增加。2.2PAM212細胞中TSLP的表達與VDＲ無關(guān)VDＲ激動劑MC903在0.3～10μmol/L范圍內(nèi)刺激圖202F04對PAM212細胞TSLP表達的影響Fig．2Effectof02F04onTSLPexpressioninPAM212cellsNote:*.P＜0.05，＊＊.P＜0.01，＊＊＊.P＜0.001vsthecorrespondingcontrol;A.■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability;B.Valuesinthecontrolgroupwithtreatmentfor8hweresetto1.0.圖3VDＲ激動劑不能誘導(dǎo)PAM212細胞中TSLP的表達Fig．3TSLPexpressioninPAM212cellswasnotinducedbyagonistofVDＲNote:■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability.翁琰等甾體衍生物02F04通過非核受體上調(diào)PAM212細胞胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素的研究第11期·1921·

【參考文獻】：
期刊論文
[1]TSLP促進肌成纖維細胞向哮喘小鼠氣道募集[J]. 孟平,陳壯桂,張?zhí)焱?李洪濤,鄒小玲,楊海玲.  中國免疫學(xué)雜志. 2016(06)



本文編號：2911004