發(fā)布時(shí)間：2020-11-01 12:44

　　 本研究以液態(tài)懸浮芯片為技術(shù)平臺(tái),選取13種高、低危HPV型別作為研究對(duì)象,分別以臨床出現(xiàn)的單獨(dú)一型和混合型HPV感染為模型,建立了基因分型的新方法。應(yīng)用所建立的液態(tài)懸浮芯片分型方法,對(duì)尖銳濕疣標(biāo)本和宮頸糜爛標(biāo)本進(jìn)行了HPV基因分型的測(cè)定。 本課題以國(guó)際公認(rèn)的HPV質(zhì)粒作為陽(yáng)性參照標(biāo)準(zhǔn),設(shè)計(jì)了基因分型檢測(cè)系統(tǒng),并對(duì)HPV通用引物和探針進(jìn)行了篩選,建立了PCR反應(yīng)體系、雜交反應(yīng)體系,對(duì)影響雜交反應(yīng)的因素做了較為系統(tǒng)的分析,獲得了最佳反應(yīng)條件。質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)結(jié)果證明該方法可對(duì)HPV準(zhǔn)確分型。為確立陽(yáng)性診斷的標(biāo)準(zhǔn),運(yùn)用判別分析的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法建立了特征判別的函數(shù)。根據(jù)判別函數(shù),對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣本進(jìn)行回代分析,其檢測(cè)的陽(yáng)性準(zhǔn)確率達(dá)96.7%以上。與反向雜交方法的對(duì)照實(shí)驗(yàn)顯示,兩種方法的符合率為82%。應(yīng)用本研究方法檢測(cè)126例尖銳濕疣標(biāo)本和100例宮頸糜爛標(biāo)本,檢出率分別為79%和9%。 與反向雜交方法相比,液態(tài)懸浮芯片易于操作,省時(shí)省力,通量和敏感性更高,在臨床上具有更廣的發(fā)展空間。臨床標(biāo)本結(jié)果顯示,該研究對(duì)于疾病的篩查和流行病學(xué)的預(yù)測(cè)有重要的意義。
【學(xué)位單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2006
【中圖分類(lèi)】：R373;Q789
【部分圖文】：

圖2液態(tài)懸浮芯片技術(shù)原理圖圖3加mnixe儀器照片伽mniex公司研制的微球是用兩種不同顏色的熒光染料(紅色和橙色)在不比例下混合后分別將直徑為5.6產(chǎn)m的聚苯乙烯微球染成為一百種顏色的點(diǎn)陣。據(jù)微球所攜帶的獨(dú)特的橙色/紅色熒光配比，通過(guò)流式細(xì)胞儀時(shí)可予以區(qū)分。

液態(tài)芯片則是一種很有市場(chǎng)潛力的新技術(shù)。3液態(tài)生物芯片技術(shù).31液態(tài)生物芯片的技術(shù)原理液態(tài)生物芯片也稱(chēng)液態(tài)懸浮芯片網(wǎng)，]el，該技術(shù)是一種以微球?yàn)榛A(chǔ)的多指標(biāo)數(shù)據(jù)采集和分析平臺(tái)，起源于流式細(xì)胞儀。多指標(biāo)檢測(cè)是指在一個(gè)簡(jiǎn)單的試管中對(duì)一份樣品同時(shí)進(jìn)行多種指標(biāo)的分析。由于流式細(xì)胞儀有區(qū)分不同大小和顏色微球的能力，使得這種方法可以用于不同類(lèi)別微球群的分析。以大小進(jìn)行區(qū)分的微球允許同時(shí)對(duì)多種指標(biāo)進(jìn)行分析，但是小微球的聚集物與大微球不能很好的區(qū)分開(kāi)來(lái)，限制了這種以大小區(qū)分微球得應(yīng)用范圍。相比之下，用可以產(chǎn)生兩種不同波長(zhǎng)染料對(duì)相同大小的微球進(jìn)行染色，以區(qū)分不同微球的方法得到廣泛采用。

技術(shù)路線
【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 姚敏杰;基于磁性微粒和熒光微球的DNA檢測(cè)方法研究[D];西北大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2865550