骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中的實(shí)時(shí)超微結(jié)構(gòu)形態(tài)變化以及肌漿網(wǎng)內(nèi)Ca~(2+)如何釋放的問題是生物物理學(xué)及細(xì)胞生物學(xué)最感興趣的研究課題之一。由于常規(guī)研究方法不能在毫秒級(jí)水平獲得骨骼肌興奮收縮偶聯(lián)過程中的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)變化以及Ca~(2+)變化的相關(guān)信息，因此該課題也是目前國(guó)內(nèi)外研究的難點(diǎn)課題之一。 本課題以探索解決上述難題為研究目標(biāo)，采用計(jì)算機(jī)實(shí)時(shí)控制的電刺激(時(shí)間分辨率為10us)—超低溫快速冷凍實(shí)時(shí)固定技術(shù)，結(jié)合冷凍置換技術(shù)和透射電子顯微鏡對(duì)骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中各時(shí)間點(diǎn)的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)進(jìn)行了實(shí)時(shí)分析研究，并對(duì)骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)的時(shí)相變化以及鈣離子釋放的可能機(jī)制進(jìn)行了分析討論。結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 一、采用快速冷凍實(shí)時(shí)固定技術(shù)固定的骨骼肌內(nèi)各種超微結(jié)構(gòu)保存完好，清晰可見。 二、骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中三聯(lián)體的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)發(fā)生實(shí)時(shí)變化 三、骨骼肌興奮收縮偶聯(lián)時(shí)，細(xì)胞膜上及細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)大量小泡 1．施加電刺激4.6ms后，細(xì)胞膜下出現(xiàn)大量小泡，小泡間趨向融合，形成3-8個(gè)小泡組成的多聚體。 2．電刺激24ms后小泡消失，僅殘余少量有被小泡緊靠細(xì)胞膜下 結(jié)果提示細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高有可能通過小泡轉(zhuǎn)運(yùn)方式將細(xì)胞外鈣離子轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)，激光共聚焦顯微鏡下觀察到的Ca~(2+)∶sparks現(xiàn)象也可能通過多個(gè)小泡聚合引起局部鈣離子濃度升高。超低溫快速冷凍實(shí)時(shí)固定技術(shù)及電鏡技術(shù)是研究毫秒級(jí)生理活動(dòng)的極為有效的手段，為今后研究生理活動(dòng)的瞬時(shí)功能形態(tài)變化奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：Q67
【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
中文詳細(xì)摘要
前言
材料與方法
    一、 實(shí)驗(yàn)用試劑及配制
        （一） 、 實(shí)驗(yàn)用試劑
        （二） 、 溶液的配制
    二、 實(shí)驗(yàn)器械和儀器
    三、 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及樣品的取材
        （一） 、 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        （二） 、 樣品的取材
    四、 電刺激-超低溫快速冷凍固定毫秒級(jí)實(shí)時(shí)處理系統(tǒng)
        （一） 、 電刺激-超低溫快速冷凍固定毫秒級(jí)實(shí)時(shí)處理系統(tǒng)的組成
        （二） 、 電刺激-超低溫快速冷凍固定毫秒級(jí)實(shí)時(shí)處理系統(tǒng)的原理
        （三） 、 縫匠肌組織的電刺激-超低溫快速冷凍固定實(shí)時(shí)處理的操作
    五、 冷凍置換
    六、 制樣和電鏡觀察
        （一） 、 脫水、浸透和包埋
        （二） 、 切片和染色
        （三） 、 電鏡觀察
結(jié)果
    一、 冷凍固定后骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)
    二、 骨骼肌在興奮-收縮偶聯(lián)過程中超微結(jié)構(gòu)形態(tài)的實(shí)時(shí)變化
        （一） 骨骼肌肌膜下小泡超微結(jié)構(gòu)形態(tài)實(shí)時(shí)變化
        （二） 骨骼肌三聯(lián)體的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)實(shí)時(shí)變化
討論
    一: 電刺激-超低溫快速冷凍實(shí)時(shí)固定系統(tǒng)建立的意義
    二: 骨骼肌三聯(lián)體在興奮一收縮偶聯(lián)過程中實(shí)時(shí)超微結(jié)構(gòu)形態(tài)變化與其功能的關(guān)系
    三: 骨骼肌肌膜下小泡與激光聚焦顯微鏡下觀察Ca-2+sparks現(xiàn)象的關(guān)系
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述正文
    綜述參考文獻(xiàn)
學(xué)習(xí)期間發(fā)表的文章和擬發(fā)表的文章
致謝

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 楊勇驥,鄭尊,夏愿耀,顏永碧,王根英;生物樣品的快速冷凍及冰凍置換[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1991年06期

2 俞國(guó)新;衛(wèi)宇;;接觸式低溫固定中傳熱過程的分析[J];電子顯微學(xué)報(bào);1993年03期

3 楊勇驥，鄭尊，夏愿耀，吳越，邵曉良;無(wú)冷凍防護(hù)劑保護(hù)的生物組織快速冷凍研究[J];電子顯微學(xué)報(bào);1994年05期

4 楊勇驥,鄭尊,邵曉良,吳越,夏愿耀,夏金輝;無(wú)冷凍防護(hù)劑保護(hù)時(shí)的心、腎組織快速冷凍研究[J];電子顯微學(xué)報(bào);1996年05期

5 楊勇驥,鄭尊,余宏宇,夏金輝,夏愿耀;電刺激-冷凍固定法研究興奮收縮偶聯(lián)時(shí)骨骼肌的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)變化[J];電子顯微學(xué)報(bào);1997年03期

6 楊勇驥,鄭尊,吳越,夏愿耀,夏金輝;無(wú)冷凍防護(hù)劑保護(hù)的大鼠心肌組織超低溫快速冷凍研究[J];電子顯微學(xué)報(bào);1998年02期

7 宋田斌,鄭尊,楊勇驥,吳越;制作運(yùn)動(dòng)終板電鏡標(biāo)本的一種簡(jiǎn)單方法[J];解剖學(xué)雜志;1999年01期

8 楊勇驥，鄭尊，夏愿耀，邵曉良，肖輝;大鼠腎組織的超低溫快速冷凍固定和冷凍置換研究[J];分析測(cè)試學(xué)報(bào);1994年04期

本文編號(hào)：2864988