【摘要】：研究背景 神經干細胞是一種未分化細胞，具有自我更新、增殖的特性和分化為神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的潛能。目前已經證實，哺乳動物胚胎期的大部分腦區(qū)和成年期的腦室下區(qū)、海馬齒狀回都含有豐富的神經干細胞。這種細胞能依賴于無血清培養(yǎng)液中絲裂原的感應而增殖，其它的原代細胞在這種培養(yǎng)液中不能存活。因而，可以在體外培養(yǎng)、擴增并獲得高純度的神經干細胞。研究表明將體外擴增的神經干細胞移植到成年鼠腦內，發(fā)現(xiàn)這些被移植的細胞在宿主腦內能很好地存活，并向周圍遷移，最后分化成同移植部位宿主細胞表型類似的神經細胞，而且與周圍的神經元形成突觸聯(lián)系。神經干細胞具有分化成移植部位局部特異性細胞的能力，是損傷或病變腦組織細胞移植的理想的組織來源，為神經系統(tǒng)退行性疾病和顱腦損傷的治療開辟了一條廣闊的道路。 本課題以海人酸特異性毀損成年大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞，將來源于胎鼠海馬的神經干細胞移植于毀損區(qū)，觀察神經干細胞的存活、遷移和分化。為臨床神經干細胞替代治療做準備。 研究目的 1．研究胎鼠腦海馬神經干細胞的分離、培養(yǎng)、增殖及分化特點。 2．觀察胎鼠神經干細胞移植入海人酸毀損大鼠海馬中的遷移和分化情況。 研究方法 1．采用無血清培養(yǎng)、單細胞克隆技術及免疫細胞化學方法，觀察海馬源性神經干細胞的體外擴增和貼壁分化情況。 2．立體定位注射海人酸毀損大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞。 3．毀損一周后，將Hoechst33342標記的神經干細胞移植毀損區(qū)，分別于術后1周、2周、4周、8周取材，利用免疫熒光技術，追蹤移植的神經干細胞在毀損側海馬中的存活、遷移和分化情況。 研究結果 1．從大鼠胚胎腦海馬分離的細胞具有增殖能力，可以傳代培養(yǎng)，子代細胞免疫組化顯示神經巢蛋白(Nestin)陽性。經含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，貼 南京醫(yī)科大學碩士學位論文 壁可分化為微管相關蛋白一2(MAP:)、膠質纖維酸性蛋白(GFAP)陽 性細胞。 2.海人酸特異性毀損大鼠海馬CAI區(qū)錐體細胞。 3.移植的神經干細胞在海馬錐體層呈鏈狀遷移，并分化為MAP:陽性細 胞和GFAP陽性細胞。 研究結論 1.用本方法分離培養(yǎng)的細胞具有自我復制和多向分化的能力，是中樞神 經系統(tǒng)的干細胞。 2.立體定位注射小劑量海人酸特異性毀損海馬錐體細胞，不影響過路神 經纖維。 3.移植的神經干細胞在海馬錐體層呈鏈狀遷移，可分化為神經元和星形 膠質細胞，大部分神經干細胞分化為星形膠質細胞。
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R329

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