GDNF在大鼠神經系統(tǒng)發(fā)育分化中的基因表達分布與變化及GDNF基因克隆與表達
發(fā)布時間:2020-06-13 00:50
【摘要】:GDNF是剛被發(fā)現(xiàn)的一種新型神經營養(yǎng)因子,由于對中樞多巴胺能神經元、腦脊運動神經元這兩類易受損而產生退行性變神經元具有極強的特異性促營養(yǎng)活性而倍受研究工作者們的重視,通過基因敲除技術已發(fā)現(xiàn)它對交感、副交感,軀體感覺神經元以及運動神經元的發(fā)育起重要作用,然而,對于其在神經系統(tǒng)內的詳細發(fā)育分布狀況卻至今知之不多。本實驗利用原位雜交技術結合RT-PCR技術觀察了GDNF從E16~成年大鼠神經系統(tǒng)內的分布;為了更進一步研究GDNF在神經發(fā)育中的作用與作用機制,,本實驗還利用基因克隆技術克隆了人GDNF基因并進行了原核表達GDNF蛋白的研究。 本實驗結果如下: (1).GDNF在神經系統(tǒng)內的分布:主要集中在紋狀體、僵核、腦脊髓運動神經核團、脊髓前后角、三叉神經節(jié)、背根神經節(jié)內,散在于海馬結構內。在紋狀體、僵核內,于E16~P7期間表達較強,三叉神經節(jié)、背根神經節(jié)內,在P0~P10期間出現(xiàn)一過性表達,在腦、脊髓運動神經元核團內,GDNF表達在所研究的時間范圍內出現(xiàn)兩次峰值,即E16~P0、P7~P14。以述區(qū)域內,在P21以后,表達迅速下降,至成年,幾乎很少出現(xiàn)陽性信號。這些結果提示:GDNF可能在大鼠出生前后,對上述區(qū)域內效應神經元的生長、發(fā)育起調控作用。 (2).本研究利用RT-PCR技術克隆了編碼人GDNF基因,通過測序表明所克隆到的序列與發(fā)表序列一致,在原核細胞中表達出了GDNF蛋白,測活表明具有促中腦神經元營養(yǎng)活性,為我們進一步研究GDNF打下了基礎。
【圖文】:
GDNF于尾殼核內分布
GDNF在舌下神經核內的分布
【學位授予單位】:第四軍醫(yī)大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:1997
【分類號】:R346
本文編號:2710366
【圖文】:
GDNF于尾殼核內分布
GDNF在舌下神經核內的分布
【學位授予單位】:第四軍醫(yī)大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:1997
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