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生長(zhǎng)抑素在大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞發(fā)育中的表達(dá)及功能研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-06 09:44
【摘要】:生長(zhǎng)抑素(Somatostatin SST or Growth release-inhibiting hormone,GHRIH)是一種腦腸肽,廣泛分布于神經(jīng)系統(tǒng)、胰腺和胃腸道等組織,具有激素和神經(jīng)遞質(zhì)或調(diào)質(zhì)的雙重作用,參與多種生理活動(dòng)的調(diào)節(jié)和某些疾病的病理過(guò)程。目前,SST在發(fā)育學(xué)領(lǐng)域的研究較為廣泛和深入,許多文獻(xiàn)證實(shí)SST在機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中廣泛表達(dá),在時(shí)間和空間上與該區(qū)域組織細(xì)胞的分化成熟密切相關(guān)。以往許多研究資料證明在大鼠視網(wǎng)膜發(fā)育過(guò)程中,SST的表達(dá)出現(xiàn)在胚胎晚期和生后早期,推測(cè)SST可能在視網(wǎng)膜的發(fā)育成熟過(guò)程中發(fā)揮重要作用。在節(jié)細(xì)胞發(fā)育方面,有資料證實(shí)在PND7-14部分節(jié)細(xì)胞短暫表達(dá)SST多肽,除此以外,胚胎期、生后發(fā)育期和成年節(jié)細(xì)胞SST表達(dá)情況國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有報(bào)道。在應(yīng)用免疫組化技術(shù)研究胚胎期大鼠下丘腦區(qū)SST免疫陽(yáng)性細(xì)胞及纖維的分布時(shí),我們觀察到視交叉、視束區(qū)存在大量的SST免疫陽(yáng)性纖維,推測(cè)胚胎期視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞可能在一定階段合成SST輸入上級(jí)視覺(jué)中樞。因此,我們首先應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)發(fā)育期視交叉、視束SST陽(yáng)性纖維的分布變化;原位雜交技術(shù)檢測(cè)視網(wǎng)膜發(fā)育過(guò)程中SST mRNA的分布表達(dá),著重觀察視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層SST mRNA的分布情況,為證明視網(wǎng)膜發(fā)育期SST的重要作用提供形態(tài)學(xué)依據(jù);其次,在胚胎期和生后發(fā)育期節(jié)細(xì)胞表達(dá)SST的特定階段,我們應(yīng)用特異性耗竭劑有效降低發(fā)育過(guò)程中SST多肽含量,觀察節(jié)細(xì)胞的形態(tài)以及視覺(jué)傳導(dǎo)改變,確定SST是否在節(jié)細(xì)胞的產(chǎn)生、分化以及視覺(jué)傳導(dǎo)通路形成和成熟過(guò)程中發(fā)揮重要的生物學(xué)作用。主要結(jié)果如下: 1. 在下丘腦視交叉和視束,在E16時(shí)開(kāi)始檢測(cè)到陽(yáng)性纖維的存在,E16~18陽(yáng)性纖維密度急劇增加,E19開(kāi)始下降,E21未觀察到陽(yáng)性纖維存在。 2. 視網(wǎng)膜發(fā)育過(guò)程中SST mRNA的表達(dá):在E13視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層檢測(cè)到陽(yáng)性細(xì)胞,從E14~17陽(yáng)性細(xì)胞增加迅速,陽(yáng)性細(xì)胞從中心向外周逐漸表達(dá),E17時(shí)視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層大部分為SST mRNA陽(yáng)性細(xì)胞,E18到生后陽(yáng)性細(xì)胞逐漸減少,在PND15,只在內(nèi)神經(jīng)母細(xì)胞層和節(jié)細(xì)胞層有陽(yáng)性細(xì)胞存在,PND20時(shí)陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目及分布均與成年動(dòng)物相似。 WP=5 3. 觀察胚胎期給藥動(dòng)物時(shí),我們發(fā)現(xiàn)節(jié)細(xì)胞排列稀疏,,細(xì)胞數(shù)量減少,睜眼時(shí)間推遲,瞳孔對(duì)光反射減慢,視覺(jué)誘發(fā)電位潛伏期明顯延長(zhǎng),觀察哺乳期給藥動(dòng)物時(shí),可見(jiàn)動(dòng)物睜眼時(shí)間推遲,瞳孔對(duì)光反射減慢或消失,但節(jié)細(xì)胞層和視覺(jué)誘發(fā)電位潛伏期無(wú)明顯變化。提示SST主要在胚胎中后期對(duì)節(jié)細(xì)胞發(fā)育分化起調(diào)節(jié)作用
【圖文】:

對(duì)照組,生長(zhǎng)抑素


LE1B對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜生長(zhǎng)抑素陽(yáng)性細(xì)胞的分布,x2oo

給藥,生長(zhǎng)抑素


-z.eta給藥組大鼠視網(wǎng)膜生長(zhǎng)抑素陽(yáng)性細(xì)胞的分布,XZ《犯
【學(xué)位授予單位】:第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2002
【分類號(hào)】:R329

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