【摘要】： 目的 探討胸腺基質細胞對正常及熱應激損傷小鼠胸腺細胞的調節(jié) 作用及其機制。 方法 取5周齡BALB/c雄性小鼠胸腺，制成小鼠胸腺細胞懸液， 43℃熱應激1h后，與初代培養(yǎng)的小鼠胸腺基質細胞（TSC）及50％初 代胸腺基質細胞培養(yǎng)上清（TSC-SN）共同培養(yǎng)，在培養(yǎng)的第0、6、12、 24、48h收集胸腺細胞，計數胸腺細胞總數及存活率，，用流式細胞儀分 析胸腺細胞的凋亡率、表達Fas、Fas-L和HSP70的陽性率及CD4CD8 細胞亞群變化情況，并用光鏡和電鏡觀察TSC與胸腺細胞的相互作用。 結果（1）熱應激使胸腺細胞凋亡率、Fas、Fas-L及HSP70表達 增高，胸腺細胞凋亡與Fas、Fas-L的表達密切相關。（2）非應激的胸腺 細胞與TSC共培養(yǎng)后，存活率增高，凋亡率及Fas、Fas-L表達降低， 但細胞總數及CD4~+CD8~+（DP）細胞均顯著減少，CD4~+CD8~-和CD4~-CD8~+（SP） 的細胞比例明顯增加。（3）與TSC共培養(yǎng)的熱應激胸腺細胞，細胞總 數顯著減少，DP細胞與SP細胞均減少，HSP70的表達比熱應激對照 組增加，凋亡率及Fas、Fas-L的表達均低于單獨培養(yǎng)的熱應激對照組， 但明顯高于與TSC共培養(yǎng)的非應激的胸腺細胞組。（4）光鏡和電鏡可 觀察到TSC大量粘附和吞噬正常及熱應激胸腺細胞，其中被TSC吞入 的胸腺細胞和一些被粘附的胸腺細胞已凋亡。（5）TSC-SN可使體外培 養(yǎng)的熱應激胸腺細胞凋亡率和Fas、Fas-L表達陽性率下降，使正常胸 腺細胞凋亡率和Fas表達陽性率下降，但對正常及熱應激胸腺細胞HSP70 的表達無明顯影響。 結論（1）Fas/Fas-L介導的凋亡是體外培養(yǎng)胸腺細胞自發(fā)的及熱 應激誘導的主要死亡形式，熱應激主要誘導DP胸腺細胞凋亡，HSP70 表達增高是熱應激胸腺細胞損傷的標志；（2）TSC與正常胸腺細胞的直 接接觸具有兩種生物作用，①吞噬清除DP細胞；②可能促進部分DP 細胞分化為成熟的SP細胞，使DP細胞減少，SP胸腺細胞增加；（3） 熱應激胸腺細胞中的DP細胞和SP細胞均可被TSC吞噬，TSC促進熱應 激胸腺細胞HSP70表達增高可能具有雙重意義，既可保護胸腺細胞，又 l 可促進TSC識別和吞噬己受損或凋亡的胸腺細胞，發(fā)揮免疫監(jiān)視作用，l IHSP70在抗原提呈中的作用，可能是熱應激損傷胸腺細胞中刃細胞也 l D 可被HC識別和吞噬的分子基礎；N）TSC對非應激胸腺細胞保護作用D l 明顯強于對熱應激胸腺細胞，胸腺細胞表達Fas、Fas千與凋亡的密切l(wèi) l 關系提示一種胸腺細胞排除的機制；門）在體外，T％｛N對正常和熱 l D 應激損傷的胸腺細胞有一定的保護作用。
【學位授予單位】：第一軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2000
【分類號】：R392.12

【引證文獻】

相關博士學位論文 前1條

1 白楊;表達幽門螺桿菌粘附素保守區(qū)的減毒鼠傷寒沙門菌的構建及其免疫治療作用的研究[D];第一軍醫(yī)大學;2002年

本文編號：2650870