【摘要】：目的 利用雜交瘤技術(shù)建立分泌抗旋毛蟲肌幼蟲排泄分泌(ES)抗原單克隆抗體(McAb)雜交瘤細胞株，并對其及分泌的McAb進行鑒定。 方法 用旋毛蟲肌幼蟲ES抗原免疫BALB／C小鼠，取其脾細胞與小鼠骨髓瘤SP2／0細胞融合，，篩選分泌高滴度McAb雜交瘤細胞株，制備腹水進行純化。采用ELISA間接法、央心法、競爭法分別測定培養(yǎng)細胞上清液及腹水中McAb滴度、相對親和力和相加效應(yīng)，瓊脂雙擴散試驗鑒定免疫球蛋白類型，檢測McAb與日本血吸蟲成蟲抗原、蟲卵抗原、弓形蟲RH株速殖子抗原、豬囊蟲囊液抗原、包蟲囊液抗原、旋毛蟲成蟲表皮抗原、成蟲可溶性抗原、成蟲ES抗原、肌幼蟲可溶性抗原、肌幼蟲48hES抗原、肌幼蟲72hES抗原的交叉反應(yīng)。電鏡觀察雜交瘤細胞超微結(jié)構(gòu)，計數(shù)染色體數(shù)目及觀察雜交瘤細胞分泌McAb的穩(wěn)定性。 結(jié)果 篩選出2株分泌高滴度抗旋毛蟲肌幼蟲ES抗原McAb雜交瘤細胞株。電鏡顯示：雜交瘤細胞具有腫瘤細胞和漿細胞的特征，胞漿內(nèi)可見大量分泌顆粒；雜交瘤細胞染色體數(shù)目平均為98.6條：2株雜交瘤細胞均能穩(wěn)定分泌McAb；2株McAb均屬IgM類，B2C12株培養(yǎng)上清液和腹水McAb滴度分 天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 別為l:1280和l:2.O48xlod，EllFll株為1:640和l.024x10‘，其中 前者較后者的相對親和力高;2株McAb識別ES抗原不同的抗原決定簇; McAb與日本血吸蟲成蟲抗原、蟲卵抗原、弓形蟲RH株速殖子抗原、豬囊 蟲囊液抗原、包蟲囊液抗原、旋毛蟲成蟲表皮抗原、成蟲可溶性抗原、成蟲 ES抗原、肌幼蟲可溶性抗原、肌幼蟲48hES抗原、肌幼蟲72hES抗原均不 發(fā)生交叉反應(yīng)。 至吉士侖 獲得2株抗旋毛蟲肌幼蟲ES抗原雜交瘤細胞株，均能穩(wěn)定分泌敏感性 強、特異性高的IgM類McAb，并可識別不同的抗原決定簇，·為進一步建立 檢測旋毛蟲循環(huán)抗原(CAg)、早期診斷旋毛蟲病診斷試劑盒和制備基因工 程抗體準備了理想的試驗材料。
【圖文】：

人工培養(yǎng)的肌幼蟲(x40)

人工培養(yǎng)的肌幼蟲(又100)
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R392

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王華,程道新;旋毛蟲幼蟲單克隆抗體制備和鑒定[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1988年04期

2 馮瑞元,閻和平,劉英;抗旋毛形線蟲單克隆抗體的制備和抗原定位研究[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1990年01期

3 賈世玉,付興倫,王啟水,蘇清湘;循環(huán)抗原陽性對豬旋毛蟲病診斷價值的研究[J];肉品衛(wèi)生;1997年03期

4 溫艷;張月清;;檢測受染小鼠血清中循環(huán)抗原以診斷旋毛蟲病的研究[J];首都醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1990年01期

5 張帆,黃松,姜洪杰;不同培養(yǎng)基體外培養(yǎng)旋毛蟲新生蚴成活率分析[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2002年03期

6 閻玉河,許威光,陳輝,馬增全,朱元曉,蔡仕英;旋毛蟲肌幼蟲ES抗原的基因克隆及高效表達[J];生物工程學(xué)報;1994年01期

7 張國華,嚴新明,陸小青,蔣維明;建立抗旋毛蟲單克隆抗體細胞株的初報[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1988年02期

8 閻玉河,許威光,陳輝,馬增全,李春華,張洪權(quán),朱元曉,盧景良;旋毛蟲ES抗原特異性蛋白兩個結(jié)構(gòu)基因的序列分析及重組質(zhì)粒的構(gòu)建[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1996年01期

9 張月清,溫艷,吳趙永,許威光,王家祥,閻玉河;檢測受染旋毛蟲豬血清中循環(huán)抗原對診斷和監(jiān)測本病的研究[J];中國人獸共患病雜志;1991年06期

10 張月清,溫艷,吳趙永,許威光,馬全智,李士漢;檢測感染旋毛蟲豬血清中循環(huán)抗原以診斷和監(jiān)測本病的研究和應(yīng)用[J];中國人獸共患病雜志;1993年01期

本文編號：2632587