發(fā)布時間：2020-03-26 02:57

【摘要】：大腦皮質膽堿能神經元參與人類運動、學習和記憶,又是臨床上多種中樞神經系統(tǒng)退行性疾病的靶細胞，因此，皮質膽堿能神經元的發(fā)生是理解腦功能和探索其疾病治療途徑的基礎。端腦背側是大腦皮質發(fā)生的原基，大腦皮質可分為三部分：即中間腦皮質、背側腦皮質和側腦皮質。中間腦皮質分化產生海馬，背側腦皮質分化產生新皮質，側腦皮質分化產生蒼白皮質。端腦背側的腦室區(qū)(VZ)和腦室下區(qū)(SVZ)是產生新皮質錐體神經元的發(fā)源地，一般認為，新皮質錐體神經元主要為谷氨酸能神經元，但是在新皮質的運動區(qū)III和V層中存在著數(shù)量較多的膽堿能神經元。 在新皮質錐體神經元的發(fā)生時期，腦室區(qū)放射狀膠質細胞占98%。放射狀膠質細胞是一種特殊的細胞類型，具有雙重功能，既有膠質細胞特征，又有神經干細胞特征。前者表現(xiàn)為胞體位于腦室區(qū)，突起作為成神經細胞遷移的腳手架 ；細胞質中富含糖原顆粒；突起和毛細血管緊密接觸；相鄰放射 WP=58 狀膠質細胞之間存在細胞連接和表達幼稚膠質細胞標志性蛋白Vimentin和RC2; 后者表現(xiàn)為可在VZ和SVZ中進行對稱分裂和不對稱分裂,并產生成神經細胞；表達神經上皮標志性蛋白nestin。經實驗證實，放射狀膠質細胞可以產生大腦皮質的投射神經元，但是不產生源于端腦腹側的中間神經元。因此，本實驗欲通過對端腦背側放射狀膠質細胞的形態(tài)學觀察探索其與膽堿能神經元發(fā)生的關系，試圖為端腦背側放射狀膠質細胞產生大腦皮層的膽堿能神經元尋找實驗證據(jù)。 本試驗采用免疫組化和電鏡技術觀察了E12-18大鼠端腦背側產生皮質錐體神經元的放射狀膠質細胞形態(tài)、細胞分裂以及與膽堿能神經元的關系。首先，采用Vimentin單克隆抗體對端腦冠狀切片進行免疫組化染色（Vimentin是放射狀膠質細胞標志性蛋白），結果表明Vimentin陽性細胞胞體位于腦室區(qū)，伸出長突起到達軟腦膜表面，腦室區(qū)可見大量細胞分裂相。細胞分裂相與Vimentin陽性細胞隨胎齡的增加逐漸減少。為觀察其分裂后細胞遷移，在取材前兩天連續(xù)給E14、E16組大鼠腹腔注射BrdU，，觀察到標記BrdU的細胞遷移到皮質板外側緣。電鏡下觀察：端腦背側放射狀膠質細胞除具有對稱 WP=59 分裂和不對稱分裂的神經祖細胞特征外，還具有膠質細胞特征，如：與毛細血管緊密接觸，細胞間有連接復合體，周圍成神經細胞在放射狀膠質細胞長突起旁成柱狀排列等。為證實端腦背側放射狀膠質細胞是否可以產生皮質膽堿能神經元，采用Vimentin和乙酰膽堿轉移酶（ChAT，膽堿能神經元標志蛋白）進行免疫組化雙染，其結果為：在E14組大鼠端腦背側腦室區(qū)存在ChAT陽性的放射狀膠質細胞群。結果提示：（1）放射狀膠質細胞可以產生膽堿能神經元；（2）放射狀膠質細胞可能依據(jù)其產生不同神經元的類型分為不同亞群；（3）神經遞質乙酰膽堿可能在大腦皮層的發(fā)育過程中起重要作用。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R329

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本文編號：2600846