【摘要】：目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)對體外骨髓間充質(zhì)干細胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)趨化因子受體CXCR4表達的影響及CXCR4表達變化對BMSCs趨化遷移的調(diào)控情況。方法全骨髓法+貼壁法分離、培養(yǎng)BMSCs,不同濃度(10-10、10-9、10-8、10-7、5×10-7、10-6mol/L)的17β-雌二醇誘導經(jīng)雌激素受體拮抗劑ICI182780處理和未經(jīng)處理的BMSCs后于不同時相點(24、48 h),用RT-PCR法和Western blot法分別檢測細胞趨化因子受體CXCR4的表達情況,利用Transwell小室體外遷移體系觀察10-7mol/L 17β-雌二醇誘導前后的BMSCs對于不同濃度基質(zhì)細胞衍生因子SDF-1的定向遷移情況,及采用AMD3100阻斷SDF-1特異性受體CXCR4后對雌激素誘導前后BMSCs定向遷移的影響。結(jié)果 BMSCs在不同濃度17β-雌二醇誘導24、48 h后,其CXCR4 mRNA的表達均有不同程度的升高,其中以24 h時10-7mol/L組升高最為明顯(P0.05)。CXCR4蛋白表達在24 h各濃度組以升高為主,24 h時5×10-7mol/L組升高最為明顯,48 h各濃度組以降低為主。雌激素受體拮抗劑ICI 182780能夠明顯抑制17β-雌二醇對CXCR4表達的影響(P0.05)。BMSCs對SDF-1的定向遷移有明顯的濃度依賴性,且相同條件下17β-雌二醇誘導后的BMSCs遷移細胞數(shù)顯著高于未經(jīng)誘導的BMSCs,而CXCR4阻斷劑AMD3100可明顯抑制17β-雌二醇干預前后BMSCs的趨化遷移(P0.05)。結(jié)論 17β-雌二醇在一定的誘導時間內(nèi)可提高BMSCs CXCR4的表達,進而增強SDF-1對BMSCs的體外趨化作用。
[Abstract]:Aim to investigate the effect of 17 尾-estradiol,17 尾-E2 on the expression of chemokine receptor CXCR4 in bone marrow mesenchymal stem cells (bone mesenchymal stem cells,BMSCs) in vitro and the regulation of CXCR4 expression on chemotactic migration of BMSCs. Methods 17 尾-estradiol (17 尾-estradiol) with different concentrations of BMSCs, (10? 10, 10? 9, 10? 8, 10? 10, 5 脳 10? 7, 10? 6? mol / L) was isolated by whole bone marrow attachment method and induced by estrogen receptor antagonist ICI182780 and untreated BMSCs at different time points (24, 48 h),) after being treated with 17 尾-estradiol at different time points (24, 48 h),) after being treated with estrogen receptor antagonist ICI182780 and untreated BMSCs at different time points (24, 48 h),). The expression of chemokine receptor CXCR4 was detected by RT- PCR and Western blot, respectively. The directional migration of 10-7mol/L-17 尾-estradiol (10-7mol/L-17 尾-estradiol) to different concentrations of stromal cell-derived factor SDF-1 was observed by Transwell cell migration system in vitro. And the effect of blocking SDF-1-specific receptor CXCR4 by AMD3100 on the directed migration of BMSCs before and after estrogenic induction. Results the expression of CXCR4 mRNA in BMSCs was increased at different concentrations of 17 尾-estradiol for 24 h and 48 h, especially in 10-7mol/L group (P0.05). The expression of CXCR4 protein was mainly increased at 24 h after exposure to 17 尾-estradiol, and the expression of CXCR4 protein was mainly increased at 24 h after exposure to 17 尾-estradiol, and the expression of CXCR4 in 10-7mol/L group was significantly higher than that in control group. At 24 h, the increase of 5 脳 10-7mol/L group was the most obvious, and the decrease of each concentration group at 48 h was the most obvious. Estrogen receptor antagonist ICI 182780 could significantly inhibit the effect of 17 尾-estradiol on the expression of CXCR4 (P0.05). BMSCs had a significant concentration-dependent effect on the directed migration of SDF-1. Under the same conditions, the number of BMSCs migration cells induced by 17 尾-estradiol was significantly higher than that of uninduced BMSCs, and CXCR4 blocker AMD3100 could significantly inhibit the chemotactic migration of BMSCs before and after 17 尾-estradiol intervention (P0.05). Conclusion 17 尾-estradiol can increase the expression of BMSCs CXCR4 and enhance the chemotactic effect of SDF-1 on BMSCs in vitro.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學西南醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(81170533)~~
【分類號】：R329.2

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本文編號：2435326