【摘要】：目的 :研究含 NR2 B亞單位的 NMDA受體 (以下簡稱 NR2 B- NMDAR)與含 Glu R2亞單位的 AMPA受體 (以下簡稱 Glu R2 - AMPAR)在不同發(fā)育階段的培養(yǎng)海馬神經(jīng)元樹突上的表面表達及共定位。方法 :以 FL AG- NR2 B、GFP- Glu R2及 CFP- Actin的表達載體共轉染原代培養(yǎng) 5 d的大鼠海馬神經(jīng)元 ,分別用抗 FL AG單克隆抗體和山羊抗鼠二抗 - Cy3(紅色熒光 )、抗 GFP多克隆抗體和山羊抗兔二抗 - Alex4 88(綠色熒光 )作活細胞雙重染色 ,顯示并計數(shù)表面表達的 NR2 B- NMDAR受體簇、Glu R2 - AMPAR受體簇以及兩者共定位的受體簇。結果 :培養(yǎng) 7d和 19d時 NR2 B- NMDAR受體簇密度分別為 39.7± 5 .0和 6 4.7± 6 .1(P0 .0 1;n=6 ) ;Glu R2 - AMPAR受體簇密度分別為 5 9.1± 3.3和 99.7± 6 .4 (P0 .0 1;n=6 ) ;兩者共定位的受體簇密度分別為 2 9.9± 4 .5和 37.5± 2 .5 (P0 .0 5 ;n=6 )。培養(yǎng) 7d和 19d時 ,與 Glu R2 - AMPAR共定位的 NR2 B- NMDAR受體簇占總 NR2 B- NMDAR受體簇的比例分別 75 .4 %和 5 7.9% ,而與 NR2 B- NMDAR共定位的 Glu R2 - AMPAR受體簇占總 Glu R2 - AMPAR受體簇的比例分別為 5 0 .6 %和 37.6 %。結論 :隨著海馬神經(jīng)元的發(fā)育 ,成熟神經(jīng)元比未成熟神經(jīng)元樹突表面 NR2 B- NMDAR受體簇、Glu R2 - A
[Abstract]:Objective: to study the effects of NMDA receptor (NR2 B- NMDAR) containing NR2 B subunit and AMPA receptor (Glu R2-AMPAR) containing Glu R2 subunit on the dendrites of cultured hippocampal neurons in different developmental stages. Surface expression and co-localization. Methods: the primary cultured hippocampal neurons of rats were co-transfected with the expression vectors of FL AG- NR2 BFP-GFP- Glu R2 and CFP- Actin for 5 days. Live cell double staining was performed with monoclonal antibody against FL AG and anti-mouse second antibody Cy3 (red fluorescence), anti-GFP polyclonal antibody and goat anti-rabbit second antibody Alex4 88 (green fluorescence), respectively. The surface expression of NR2 B NMDAR receptor cluster Glu R2 AMPAR receptor cluster and co-located receptor cluster were displayed and counted. Results: the density of NR2 B- NMDAR receptor cluster was 39.7 鹵5. 0 and 64. 7 鹵6. 1 (P0. 01). The density of Glu R2-AMPAR receptor cluster was 59. 1 鹵3. 3 and 99. 7 鹵6. 4 (P0. 01). The densities of colocalized receptor clusters were 29.9 鹵4.5 and 37.5 鹵2.5respectively (P0. 05). After 7 days and 19 days of culture, NR2 B NMDAR receptor clusters co-located with Glu R2 AMPAR accounted for 75. 4% and 57. 9% of total NR2 B NMDAR receptor clusters, respectively. The percentage of Glu R2-AMPAR receptor cluster colocated with NR2 B-NMDAR was 50. 6% and 37. 6% of total Glu R 2-AMPAR receptor cluster, respectively. Conclusion: with the development of hippocampal neurons, the NR2 B- NMDAR receptor cluster on the dendritic surface of mature neurons is higher than that of immature neurons.
【作者單位】： 浙江大學醫(yī)學院神經(jīng)生物學教研室 浙江大學醫(yī)學院神經(jīng)生物學教研室 浙江大學醫(yī)學院神經(jīng)生物學教研室 浙江大學醫(yī)學院神經(jīng)生物學教研室 浙江大學醫(yī)學院神經(jīng)生物學教研室 浙江大學醫(yī)學院神經(jīng)生物學教研室
【基金】：國家“973”計劃基金 (G19990 5 4 0 0 3) 國家自然科學基金 (39970 84 4 )資助項目
【分類號】：R329

【參考文獻】

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本文編號：2230972