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絨山羊毛囊干細胞的分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化鑒定

發(fā)布時間:2018-08-18 07:36
【摘要】:試驗旨在建立絨山羊毛囊干細胞體外分離培養(yǎng)方法,并對其生物學(xué)特性和多向分化潛能進行鑒定。利用兩步酶消化法和差速貼壁法分離純化毛囊干細胞,對其進行傳代培養(yǎng),測定生長曲線和克隆形成率,采用油紅O和茜素紅染色法對第5代毛囊干細胞向成脂和成骨分化情況進行鑒定。結(jié)果顯示,分離得到的毛囊干細胞形態(tài)均一,體積小,呈典型的鋪路石狀生長,生長曲線呈S型,克隆形成能力強。成脂誘導(dǎo)后,細胞體積增大,細胞質(zhì)增多,胞內(nèi)出現(xiàn)小脂滴,誘導(dǎo)12d后,脂滴逐漸增多,油紅O染色呈陽性;成骨誘導(dǎo)后,細胞邊緣模糊,出現(xiàn)顆粒狀結(jié)節(jié),經(jīng)茜素紅染色呈陽性。表明獲得的絨山羊毛囊干細胞具有多向分化的潛能。
[Abstract]:The aim of this study was to establish a method for isolation and culture of cashmere goat hair follicle stem cells in vitro and to identify their biological characteristics and multidirectional differentiation potential. Hair follicle stem cells were isolated and purified by two-step enzyme digestion method and differential adherence method. The growth curve and clone formation rate were measured. Oil red O and alizarin red staining were used to identify the adipogenic and osteogenic differentiation of the 5th generation hair follicle stem cells. The results showed that the isolated hair follicle stem cells were homogeneous in morphology, small in volume, typical in paving stone shape, with S shape growth curve and strong clone forming ability. After adipogenic induction, the cell volume increased, the cytoplasm increased, and small lipid droplets appeared in the cell. After 12 days of induction, the lipid droplets increased gradually, and the oil red O staining was positive, and after osteogenesis, the edge of the cells was blurred and granular nodules appeared. It was positive by alizarin red staining. The results showed that the Cashmere Goat hair follicle stem cells had the potential of multiple differentiation.
【作者單位】: 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;內(nèi)蒙古自治區(qū)生物制造重點實驗室;內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30901016、31160445)
【分類號】:R329

【參考文獻】

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【共引文獻】

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9 朱培成;yす,

本文編號:2188783


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