本文選題：聚乙烯二氨基三嗪 + 氫鍵��； 參考：《天津大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 本工作研制出一種新型的通過(guò)氫鍵作用于DNA堿基對(duì)以達(dá)到復(fù)合DNA目的非病毒載體。以自由基無(wú)規(guī)聚合的方式制備了聚乙烯二氨基三嗪(PVDT)及其與乙烯基吡咯烷酮(VP)的共聚物,并精制出水溶部分。瓊脂糖凝膠電泳顯示PVDT基聚合物可有效復(fù)合DNA,并通過(guò)氫鍵作用使DNA縮合成密實(shí)狀態(tài),有效置換溴化乙錠(EB)。隨著DNA的復(fù)合,圓二色譜(CD)發(fā)現(xiàn)DNA構(gòu)象由B型向C型轉(zhuǎn)變,并出現(xiàn)psi型譜線,可能緣于DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)的改變(長(zhǎng)程手性結(jié)構(gòu))。透射電鏡(TEM)下,被PVDT基聚合物縮合的DNA呈現(xiàn)球狀、環(huán)狀或大的聚集體,類(lèi)似于陽(yáng)離子載體縮合DNA的形態(tài)。以熒光素酶和增強(qiáng)的綠色熒光蛋白報(bào)告基因研究PVDT基載體對(duì)非洲猴腎(COS-1)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,結(jié)果表明PVDT基載體具有滿意的轉(zhuǎn)染效率,比商品化ExGen 500有著更高的轉(zhuǎn)染活性和更低的細(xì)胞毒性。PVDT基載體可有效保護(hù)DNA免受DNase I的酶解,復(fù)合物在牛血清蛋白(BSA)下仍具有高的穩(wěn)定性。鑒于這些特點(diǎn),PVDT基載體優(yōu)于傳統(tǒng)陽(yáng)離子載體,并有望用于體內(nèi)轉(zhuǎn)基因應(yīng)用中。
[Abstract]:In this work, a novel non-viral vector was developed to compound DNA base pairs by hydrogen bonding. Polyethylene diamintriazine (PVDT) and its copolymers with vinyl pyrrolidone (VP) were prepared by free radical random polymerization. Agarose gel electrophoresis showed that PVDT-based polymer could effectively compound DNA, and the DNA was condensed into dense state by hydrogen bonding, and ethidium bromide (EB) was effectively replaced. With the combination of DNA, circular dichroism (CD) showed that the conformation of psi changed from type B to type C, and the spectral line of psi appeared, which may be due to the change of higher structure of DNA (long range chiral structure). Under transmission electron microscopy (TEM), the DNA condensed by PVDT-based polymers showed spherical, circular or large aggregates, similar to the condensation of DNA by cationic carriers. Luciferase and enhanced green fluorescent protein reporter gene were used to study the transfection of African monkey kidney (COS-1) cells by PVDT base vector. The results showed that PVDT base vector had a satisfactory transfection efficiency. Compared with commercial ExGen 500, it has higher transfection activity and lower cytotoxicity. PVDT base vector can effectively protect DNA from DNase I hydrolysis, and the complex still has high stability under bovine serum protein (BSA). In view of these characteristics, PVDT base vector is superior to traditional cationic vector, and it is expected to be used in transgenic applications in vivo.
【學(xué)位授予單位】：天津大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R346

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2111286