本文選題：假單胞菌TS1138 + 基因克隆　； 參考：《沈陽藥科大學》2005年碩士論文

【摘要】：本研究室從土壤中篩選獲得了一株假單胞菌TS1138，可轉化DL-ATC合成L-半胱氨酸。本論文對代謝途徑中的兩種轉化酶基因和一種分解酶基因在基因克隆和表達等方面進行了研究，研究結果如下： 以pBluescript SKⅡ為載體，以大腸桿菌w3110 cysB~-為受體菌，鳥槍法成功構建TS1138菌株的基因組隨機文庫，建立特異性篩選模型從中獲得兩段基因，并將其轉化大腸桿菌BL21(DE3)。通過對重組蛋白的功能鑒定可知，，這兩段基因分別為L-ATC水解酶基因和S-氨甲酰-L-半胱氨酸酰胺水解酶基因。實驗從分子水平上驗證了假單胞菌由DL-ATC酶法合成L-半胱氨酸S-代途徑的正確性。 以NCBI上收錄的脫巰基酶基因為參考，自行設計引物，以TS1138菌株基因組DNA為模板，擴增得到一段基因，并表達于大腸桿菌BL21(DE3)內。通過活性檢測對重組蛋白進行功能鑒定可知該基因為L-半胱氨酸脫巰基酶基因。
[Abstract]:A strain of Pseudomonas sp. TS1138 was obtained from soil in our laboratory, which can transform DL-ATC to synthesize L-cysteine. In this paper, two invertase genes and one catabolic enzyme gene in metabolic pathway were studied in gene cloning and expression. The results are as follows: Using pBluescript SK 鈪

本文編號：1818532