低強度脈沖超聲對皮膚成纖維細胞增殖的影響
本文選題:低強度脈沖超聲 切入點:成纖維細胞 出處:《重慶醫(yī)科大學》2007年碩士論文
【摘要】: 超聲波被廣泛應用于醫(yī)學治療和診斷領域,高強度聚焦超聲作為一種無創(chuàng)性治療手段正日益受到人們的重視。低強度脈沖超聲波(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)具有刺激細胞增殖和細胞外基質合成增加的作用,已逐漸應用于骨與軟組織創(chuàng)傷的愈合和神經修復治療中。目前,LIPUS對人皮膚成纖維細胞的影響研究還較少,為了探討超聲治療皮膚疾病的應用前景,我們研究了LIPUS對人皮膚成纖維細胞的增殖及膠原蛋白合成的影響,為LIPUS治療皮膚疾病提供理論依據。并開展了聚焦超聲治療神經性皮炎和慢性濕疹的臨床研究,進行了超聲治療皮膚疾病的初步探討。 一、LIPUS促進皮膚成纖維細胞增殖的適宜輻照參數篩選 用輻照參數為1 MHz、1.2 MHz、1.7 MHz,每一頻率下四種不同聲強的LIPUS,同一聲強分別輻照0 min(假照組)、5 min、10 min、15 min、20 min和30 min體外培養(yǎng)的成纖維細胞,輻照24 h后觀察成纖維細的生長增殖情況,采用MTT法測定其吸光光度值,計算其相對成活值,通過比較不同輻照參數對細胞的相對成活率的影響,篩選出促進皮膚成纖維細胞生長的最適宜頻率、聲強和輻照時間。 結果: (1)用MTT法測定三種頻率(1 MHz、1.2 MHz、1.7 MHz),每一頻率下四種聲強的LIPUS輻照成纖維細胞5 min,24 h后吸光光度值均增加,輻照成纖維細胞10 min,24 h后吸光光度值增加最高,較對照組都有顯著性差異(P0.05)。超過一定輻照時間后,吸光光度值下降,且隨著輻照時間的延長,吸光光度值下降顯著。(2)比較細胞的相對成活率發(fā)現,頻率1 MHz、聲強0.1 W/cm2、輻照時間5 min時細胞相對成活率為1.195,10 min時達1.325,與其它輻照參數組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),兩者之間比較P0.05,有統(tǒng)計學意義。10 min時的細胞相對成活率最高,與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:⑴不同頻率、不同聲強的LIPUS輻照一定時間均能促進人真皮成纖維細胞增殖,超過一定輻照時間則會抑制細胞生長。⑵頻率1 MHz、聲強0.1 W/cm2、輻照時間10 min為促進成纖維細胞增殖較為適宜的輻照參數。 二、低強度脈沖超聲對皮膚成纖維細胞增殖及膠原蛋白合成的影響 采用最適宜聲參數——頻率1 MHz、聲強0.1 W/cm2的LIPUS輻照體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細胞,分別輻照5 min,10 min及20 min,采用H3-胸腺嘧啶核苷摻入試驗檢測其對細胞合成DNA的影響,H3-脯胺酸摻入試驗檢測其對細胞合成膠原蛋白的影響,并用流式細胞儀檢測其對細胞周期的影響。結果:頻率1 MHz、聲強0.1 W/cm2的LIPUS輻照成纖維細胞5 min,24 h后細胞H3-胸腺嘧啶核苷H3- TdR摻入量為對照組的1.27倍、H3-脯胺酸摻入量為對照組的2.22倍,輻照10 min,24 h后H3- TdR摻入量為對照組的1.55倍、H3-脯胺酸摻入量為對照組的2.31倍,與對照組比較均有統(tǒng)計學差異(P0.05),而輻照10 min時摻入量達最高,較5 min組有顯著性差異(P0.05),隨著輻照時間進一步增加摻入量反而下降。LIPUS輻照5 min,S期細胞為(13.84±1.77)%,較對照組增加(P0.05);輻照10 min后S期細胞為(20.56±3.56)%,較對照組增加(P0.05);而輻照10 min G2/M期細胞(15.89±1.75)%,較對照組下降(P0.05)。結論:LIPUS輻照一定時間能夠促進人皮膚成纖維細胞DNA及膠原蛋白合成增加,并可以使細胞的周期發(fā)生改變,促進細胞從G2/M期進入S期,從而促進細胞的增殖。 三.聚焦超聲治療神經性皮炎和慢性濕疹的初步探討 采用自身對照法對聚焦超聲治療51例神經性皮炎患者和51例慢性濕疹患者進行了療效觀察和安全性評價。治療組采用重慶海扶技術有限公司研制生產的CZP型皮膚超聲治療儀進行治療,對照組治療采用安慰劑(白凡士林)外涂,每日2次。治療后一月觀察病人的主觀癥狀、體征以及出現的其他不良反應,評價超聲治療的有效性和安全性,并進行統(tǒng)計分析。結果:治療后1月,治療組神經性皮炎患者和慢性濕疹患者各項瘙癢/體征指標計分及總計分均有明顯下降,與對照組組間比較有顯著差異(P0.05〉。治療后1月,神經性皮炎患者治療組的痊愈率和痊愈顯效率分別為2%和52.9%;慢性濕疹患者治療組的痊愈率和痊愈顯效率分別為4%和54.9%,與對照組比較均顯著性增加(P0.05〉;不同程度(重度9,輕度≤9)神經性皮炎和慢性濕疹治療1月后療效無顯著性差異;超聲治療后患者瘙癢情況明顯改善,治療后90.2%慢性濕疹患者、80.4%神經性皮炎患者瘙癢基本消失或明顯減輕;治療后無不良反應發(fā)生。結論:超聲波可以有效治療慢性濕疹和神經性皮炎,是一種新型的、有效的、安全的物理治療手段,是一種值得推廣也需要進一步研究的新興物理治療方法。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2007
【分類號】:R312
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本文編號:1663146
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