本文選題：基質(zhì)微環(huán)境　切入點：巨噬細胞　出處：《泰山醫(yī)學(xué)院》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：20世紀(jì)80年代,許多的研究者在研究李斯特菌感染以及利士曼原蟲感染時,發(fā)現(xiàn)了具有免疫抑制活性的巨噬細胞,這表明體內(nèi)在某些狀態(tài)下天然存在著一群具有免疫抑制活性的巨噬細胞。2004年,Zhang等提出了脾臟的基質(zhì)細胞能夠促進樹突狀細胞再分化為一群與巨噬細胞生物學(xué)特性類似的具有明顯免疫抑制活性的調(diào)節(jié)性樹突狀細胞。這提示了調(diào)節(jié)性樹突狀細胞和調(diào)節(jié)性巨噬細胞可能共同來源于基質(zhì)細胞的誘導(dǎo)作用。 最近有報道,在肺、腦和肝中存在調(diào)節(jié)性樹突狀細胞。這些研究促使我們將這些非免疫器官和調(diào)節(jié)性巨噬細胞聯(lián)系在一起,并據(jù)此推測這些非免疫器官內(nèi)的固有巨噬細胞除了吞噬功能和抗原提呈功能外,還發(fā)揮了免疫抑制功能。 為了驗證我們的假設(shè),我們采用全身灌注的方法去除臟器毛細血管內(nèi)的血細胞,以清除血中單核細胞的干擾。在灌注50ml培養(yǎng)基后,多數(shù)臟器包括腦、肝、肺,其色澤較未灌注臟器明顯變淺,再經(jīng)過Ⅲ型或Ⅳ型膠原酶消化,CD11b抗體磁珠富集以獲得較純的巨噬細胞。 我們采用組織塊培養(yǎng)技術(shù),培養(yǎng)新生小鼠非免疫器官的基質(zhì)細胞,并將培養(yǎng)的肺和腦組織成功建系。并且將板式酶標(biāo)儀與核酸熒光標(biāo)記相結(jié)合,建立了新的細胞增殖檢測方法,應(yīng)用本研究中。 將腹腔巨噬細胞接種于培養(yǎng)的基質(zhì)細胞之上,誘導(dǎo)10～14天后,CD11b抗體磁珠富集誘導(dǎo)后的巨噬細胞,測定其對DO11.10 OVA TCR轉(zhuǎn)基因小鼠CD4+T細胞的抑制作用。從結(jié)果分析,肺基質(zhì)細胞誘導(dǎo)的巨噬細胞具有明顯的抑制活性,相比之下,腦基質(zhì)細胞誘導(dǎo)的巨噬細胞其抑制作用并不明顯。 本研究中,我們利用了全身灌注的小鼠模型,建立了體外培養(yǎng)非免疫器官基質(zhì)細胞的方法,建立了利用板式酶標(biāo)儀和核酸熒光標(biāo)記測定細胞增殖的方法,證實了肺和腦的基質(zhì)細胞能夠誘導(dǎo)巨噬細胞產(chǎn)生免疫抑制活性。
[Abstract]:In 1980s, many researchers found macrophages with immunosuppressive activity when they studied Listeria infection and Leismania infection. In 2004, Zhang et al proposed that splenic stromal cells can promote the differentiation of dendritic cells into a colony and the biological characteristics of macrophages. Similar regulatory dendritic cells with obvious immunosuppressive activity suggest that both regulatory dendritic cells and regulatory macrophages may be derived from the induction of stromal cells. Recent reports of regulatory dendritic cells in the lungs, brain and liver have prompted us to associate these non-immune organs with regulatory macrophages. In addition to phagocytosis and antigen presentation, the intrinsic macrophages in these non-immune organs also play an immunosuppressive role. To test our hypothesis, we used systemic perfusion to remove blood cells from the visceral capillaries in order to remove the interference of monocytes in the blood. After 50 ml culture, most organs included brain, liver, lung. The color of CD11b antibody was obviously shallower than that of non-perfused viscera, and then digested with type 鈪，

本文編號：1559827