本文關(guān)鍵詞：長雙歧桿菌NCU712高密度培養(yǎng)及菌劑制備技術(shù)研究

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【摘要】：雙歧桿菌被普遍認(rèn)為是人類胃腸道中益生菌群的重要組成部分,對(duì)人類腸道疾病的防治及微生態(tài)平衡的調(diào)節(jié)尤為重要。雙歧桿菌在人體內(nèi)的數(shù)量逐年減少,為保證其益生作用的全面發(fā)揮,雙歧桿菌微生態(tài)制劑及其發(fā)酵食品的研究逐漸成為熱點(diǎn)。雙歧桿菌直投式發(fā)酵劑的研究工作主要解決了雙歧桿菌在體外培養(yǎng)難以得到濃度高、活性好、可直接用于工業(yè)生產(chǎn)的難題,本文主要研究了雙歧桿菌高密度培養(yǎng)技術(shù)及真空冷凍干燥菌粉的制備工藝。本文主要研究內(nèi)容如下:1.長雙歧桿菌NCU712(Bifidobacterium Longum NCU712,后文均簡(jiǎn)寫為B.longum NCU712)最佳增殖培養(yǎng)基配方研究。根據(jù)雙歧桿菌NCU712的生長特性,以MRSC培養(yǎng)基為基礎(chǔ),利用單因素實(shí)驗(yàn)確定葡萄糖、酵母提取粉、K2PHO4及低聚果糖為最佳成分并確定添加量。利用正交設(shè)計(jì)和均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化培養(yǎng)基組分和水平,通過對(duì)比兩種優(yōu)化結(jié)果,最終確定雙歧桿菌NCU712最佳培養(yǎng)基的配方為:葡萄糖0.5%,酵母提取粉6.4%,K2HPO4 0.3%,MgSO4 0.02%,MnSO40.005%,吐溫-80 0.1%,L-半胱氨酸0.05%,低聚果糖0.5%。利用增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)雙歧桿菌NCU712,發(fā)酵培養(yǎng)20h,活菌數(shù)達(dá)到1.39×109CFU/m L。2.B.longum NCU712培養(yǎng)條件及罐上發(fā)酵策略的確定。通過單因素實(shí)驗(yàn)確定罐上發(fā)酵接種量為10%,培養(yǎng)溫度為37℃,以氨水調(diào)節(jié)pH,維持在pH 6.0。在最佳培養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上,根據(jù)雙歧桿菌NCU712生長曲線的繪制結(jié)果,確定最佳收獲時(shí)間為20h。采用高效液相色譜法研究培養(yǎng)過程中代謝產(chǎn)物變化,產(chǎn)生的有機(jī)酸組分主要為乳酸及乙酸。將化學(xué)中和法運(yùn)用于發(fā)酵罐上培養(yǎng),發(fā)酵終點(diǎn)菌體濃度為3.8×109CFU/mL。3.高活性B.longum NCU712菌粉研制關(guān)鍵技術(shù)研究。基于高密度培養(yǎng)技術(shù)的研究,以存活率為比較標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行優(yōu)化,確定保護(hù)劑最終配方為:谷氨酸鈉5%,葡萄糖5%,甘油3%,海藻糖5%。高密度發(fā)酵菌液4500 rpm離心10min,加入保護(hù)劑,物料厚度6 mm裝入平皿,真空冷凍干燥20h。真空冷凍干燥制備的菌劑中活菌含量可達(dá)到3.3×1011CFU/m L,存活率高達(dá)89.26%,4℃環(huán)境最適合B.longum NCU712凍干菌粉的貯藏,貯藏60d后,菌粉內(nèi)活菌含量仍可達(dá)到1.07×1011CFU/m L。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R371;TQ920.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1294015