本文關(guān)鍵詞：人脂肪干細胞脂向分化中長非編碼RNA的差異表達

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【摘要】：背景:肥胖導(dǎo)致了包括高血壓、冠心病、脂肪肝、高脂血癥、2型糖尿病在內(nèi)的諸多疾病,因此深入理解脂肪細胞分化機制對于肥胖的防治具有深遠意義。目前對于脂向分化機制的研究多集中在微小RNA上,對于長非編碼RNA在脂向分化過程中的作用尚且知之甚少。目的:獲得脂向分化過程中差異倍數(shù)明顯的長非編碼RNA,并進一步篩選在脂向分化過程中可能發(fā)揮重要作用的長非編碼RNA進行驗證。方法:取人腹部皮下脂肪,采用組織塊培養(yǎng)法獲取脂肪干細胞,傳至第3代后進行成脂誘導(dǎo)分化,通過微陣列技術(shù)對脂向分化過程中0,5,12 d長非編碼RNA及mRNA差異性表達量進行統(tǒng)計,并結(jié)合生物信息學(xué)報告篩選出呈現(xiàn)明顯差異性表達的長非編碼RNA,通過qRT-PCR進行驗證。結(jié)果與結(jié)論:脂向分化過程中以差異倍數(shù)1.5(P0.05)為標準,上調(diào)長非編碼RNA的數(shù)量5 d vs.0 d 748個,12 d vs.0 d 847個,12 d vs.5 d 593個;下調(diào)長非編碼RNA的數(shù)量5 d vs.0 d 828個,12 d vs.0 d 1 113個,12 d vs.5 d 750個;結(jié)合生物信息學(xué)分析結(jié)果,在與脂類代謝有關(guān)的28個長非編碼RNA中根據(jù)誘導(dǎo)0,5,12 d差異表達倍數(shù)較高且其靶基因可能是已知的與成脂相關(guān)的基因中,篩選出3個長非編碼RNA:AK304548、BP216319、DA852857。通過PCR驗證結(jié)果顯示AK304548、BP216319及其靶基因表達量呈現(xiàn)先下調(diào)后上調(diào)的趨勢,與微陣列測序結(jié)果相符,預(yù)示其在脂向分化過程中起到調(diào)控作用。
【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;
【基金】：廣東醫(yī)學(xué)院建博科技創(chuàng)新團隊培育型立項資助(TD1123),課題名稱:長鏈非編碼RNA在人脂肪干細胞脂向分化過程中的差異性表達分析~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction肥胖已經(jīng)成為亟待解決的世界性問題,作者試圖通過微陣列芯片測序技術(shù)獲得人脂肪間充質(zhì)干細胞脂向分化過程中長非編碼RNA(Long non-coding RNAs,lncRNAs)差異表達譜,篩選出在分化過程中可能發(fā)揮重要意義的lncRNAs進行進一步驗證,初步建立lncRNAs的相關(guān)調(diào)控基

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