本文關(guān)鍵詞：小鼠骨髓源性樹突狀細胞的體外誘導培養(yǎng)及功能分析

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【摘要】：目的:建立小鼠骨髓源性樹突狀細胞(DCs)體外培養(yǎng)和擴增方法,為以DCs為靶點的免疫治療研究提供基礎(chǔ)。方法:從C57BL/6小鼠股骨和脛骨中提取骨髓細胞,以含重組小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF,400U/ml)和IL-4(200U/ml)的RPMI 1640(含10%FBS)進行誘導培養(yǎng),于培養(yǎng)第4天加入脂多糖(LPS)繼續(xù)培養(yǎng)2d。利用倒置相差顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察細胞生長狀態(tài)和超微結(jié)構(gòu),流式細胞術(shù)鑒定培養(yǎng)第6天時DCs純度及免疫表型,流式細胞微球捕獲芯片技術(shù)檢測第2、4、6天培養(yǎng)上清中細胞因子IL-6、IL-10、巨噬細胞趨化因子-1(MCP-1)、干擾素-1(IFN-1)、TNF-α、IL-12p70含量。結(jié)果:重組小鼠GM-CSF和IL-4誘導培養(yǎng)小鼠骨髓細胞4d,加入脂多糖(LPS)繼續(xù)培養(yǎng)2d,近90%細胞高表達DCs特征性標志物CD11c,高表達抗原提呈分子MHC-Ⅱ和共刺激分子CD86、CD80,具有典型的樹突狀形態(tài)學特征和分泌炎癥性細胞因子IL-6、IL-10、MCP-1、TNF-α和IL-12p70的功能。結(jié)論:小鼠骨髓細胞以重組小鼠GM-CSF和IL-4體外誘導培養(yǎng)的DCs具有較高的純度,保持了體內(nèi)的形態(tài)學、免疫表型及功能特征。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院病理科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 樹突狀細胞 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子 白細胞介素-
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81000848,81302538) 首都衛(wèi)生發(fā)展科研專項基金資助項目(2011-5002-01,2011-5002-02)
【分類號】：R392
【正文快照】： 樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)是機體重要的抗原提呈細胞,發(fā)揮免疫監(jiān)視和免疫調(diào)控功能[1]。近年來,DCs已成為感染、移植、腫瘤等領(lǐng)域的研究熱點。DCs在機體內(nèi)數(shù)量稀少,分離和純化技術(shù)復雜,因此對其研究一直存在較大的困難。本研究中通過分離小鼠骨髓細胞,利用重組細胞因子

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本文編號：1045453