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清肺培元顆粒對(duì)免疫低下肺部感染小鼠模型T淋巴細(xì)胞亞群的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-09-23 10:36

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【摘要】:目的:探討清肺培元顆粒調(diào)控免疫功能低下合并肺部感染小鼠模型血清中Th1/Th2細(xì)胞因子(IL-5、IL-12、TNF-α、GM-CSF)水平變化的作用機(jī)理,為清肺培元顆粒的臨床應(yīng)用及推廣奠定基礎(chǔ)。方法:1.動(dòng)物分組:將雌性BALB/c小鼠70只,隨機(jī)分為7組,分別為正常組、Friend鼠白血病病毒(FLV)組、FLV+肺炎鏈球菌組(模型組)、齊多夫定+青霉素V鉀片組(西藥組)、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組,每組10只。2.造模及給藥:將小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后,腹腔接種FLV病毒懸液(正常組除外),21d后,在麻醉狀態(tài)下將肺炎鏈球菌菌液以滴鼻的方式接種于小鼠。7d后開(kāi)始灌胃給藥。3.指標(biāo)檢測(cè):各組小鼠給藥結(jié)束后,麻醉狀態(tài)下摘除眼球取血至EDTAK2抗凝管中,采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定小鼠外周血中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的含量水平,并計(jì)算CD4+/CD8+比值;Bio-Plex 200懸浮芯片系統(tǒng)測(cè)定血清中IL-5、IL-12、TNF-α、GM-CSF含量;無(wú)菌操作下取出小鼠脾臟、胸腺,稱重并計(jì)算脾臟、胸腺指數(shù);肺組織HE染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察病理變化。結(jié)果:1.免疫低下合并肺炎鏈球菌肺部感染小鼠模型建立成功。2.清肺培元顆粒對(duì)小鼠一般情況有一定的改善作用。3.清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠免疫器官的影響:(1)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠胸腺質(zhì)量的影響:與正常組相比,FLV組、模型組小鼠胸腺質(zhì)量均低于正常組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與模型組相比,西藥組、清肺培元高劑量組小鼠胸腺質(zhì)量均高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),唐草片組、清肺培元低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組相比,西藥組、清肺培元高劑量組差異顯著(P0.01),唐草片組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),清肺培元低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠胸腺指數(shù)的影響:與正常組相比,FLV組及模型組小鼠胸腺指數(shù)均明顯低于正常組,差異顯著(P0.01);與模型組相比,西藥組小鼠胸腺指數(shù)均高于模型組,差異顯著(P0.01),清肺培元顆粒高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),唐草片組、清肺培元低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組比較,西藥組、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組差異顯著(P0.01),清肺培元顆粒低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(3)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠脾臟質(zhì)量的影響:與正常組相比,FLV組、模型組小鼠脾臟質(zhì)量均高于正常組,差異顯著(P0.01);與模型組相比,西藥組、清肺培元顆粒高劑量組差異顯著(P0.01),唐草片組、清肺培元顆粒低劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與FLV組對(duì)比,西藥組、清肺培元顆粒高劑量組差異顯著(P0.01),唐草片組、清肺培元顆粒低劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(4)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠脾臟指數(shù)的影響:與正常組相比,FLV組、模型組小鼠脾臟質(zhì)量均高于正常組,差異顯著(P0.01);與模型組相比,西藥組差異顯著(P0.01),唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),清肺培元顆粒低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與FLV組對(duì)比,西藥組差異顯著(P0.01),唐草片組、清肺培元顆粒高、低劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響:(1)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠外周血CD4+T細(xì)胞百分比的影響:與正常組相比,FLV組、模型組差異顯著(P0.01);與模型組相比,西藥組差異顯著(P0.01)、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),清肺培元顆粒低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組對(duì)比,西藥組差異顯著(P0.01)、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),清肺培元顆粒低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠外周血CD8+T細(xì)胞百分比的影響:與正常組相比,FLV組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組差異顯著(P0.01);與模型組相比,西藥組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組對(duì)比,西藥組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(3)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠外周血CD8+T/CD4+T細(xì)胞比值的影響:與正常組相比,FLV組、模型組均差異顯著(P0.01);與模型相比,西藥組、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組均差異顯著(P0.01)、清肺培元顆粒低劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組對(duì)比,西藥組差異顯著(P0.01)、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),清肺培元顆粒低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清Th1、Th2細(xì)胞因子的影響:(1)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清TNF-α的影響:與正常組相比,FLV組、模型組差異顯著(P0.01);與模型組相比,西藥組、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組均差異顯著(P0.01);與FLV組對(duì)比,模型組差異顯著(P0.01),唐草片組、西藥組、清肺培元顆粒高劑量組與清肺培元顆粒低劑量組相比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清IL-5的影響:與正常組相比,FLV組、模型組差異顯著(P0.01);與模型組相比,唐草片組、西藥組、清肺培元顆粒高劑量組以及清肺培元顆粒低劑量組相比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組對(duì)比,模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(3)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清IL-12的影響:與正常組相比,FLV組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)、模型組差異顯著(P0.01);與模型組相比,唐草片組、西藥組、清肺培元顆粒高劑量組以及清肺培元顆粒低劑量組相比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組對(duì)比,模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(4)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清GM-CSF的影響:與正常組相比,FLV組、模型組差異顯著(P0.01);與模型組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),西藥組、唐草片組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與FLV組對(duì)比,西藥組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組、唐草片組、西藥組、清肺培元顆粒高劑量組以及清肺培元顆粒低劑量組相比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(5)清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清Th1/Th2免疫平衡的影響:與正常組相比,FLV組、模型組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組相比,西藥組、清肺培元顆粒高劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),;與FLV組對(duì)比,模型組、唐草片組、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6.清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠肺臟病理變化的影響:與模型組相比,清肺培元顆粒高劑量組與清肺培元顆粒低劑量組的肺組織病理嚴(yán)重程度具有一定的改善。結(jié)論:1.免疫功能低下肺部感染小鼠模型建立成功,再一次證明該模型的重復(fù)性良好,有利于相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的開(kāi)展。2.清肺培元顆粒可以有效增加免疫低下肺部感染模型小鼠模型的胸腺質(zhì)量及胸腺指數(shù),降低小鼠的脾臟質(zhì)量及脾臟指數(shù),說(shuō)明清肺培元顆粒對(duì)免疫低下肺部感染小鼠模型的免疫功能具有一定的調(diào)節(jié)作用。3.清肺培元顆粒可以改善免疫低下肺部感染小鼠模型外周血中T淋巴細(xì)胞亞群的水平,清肺培元顆?梢杂行岣邫C(jī)體的免疫功能。4.清肺培元顆?梢杂行Ц纳泼庖叩拖路尾扛腥拘∈竽P脱逯蠺h1、Th2細(xì)胞因子IL-5、IL-12、TNF-α、GM-CSF的分泌水平,提示清肺培元顆?梢酝ㄟ^(guò)調(diào)控Th1/Th2的免疫平衡,達(dá)到增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能、減少免疫炎癥損傷的目的。
【關(guān)鍵詞】:清肺培元顆粒 免疫低下 肺部感染 T細(xì)胞亞群 IL-5、IL-12、TNF-α、GM-CSF
【學(xué)位授予單位】:河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R285.5;R-332
【目錄】:
  • 摘要6-10
  • Abstract10-15
  • 前言15-17
  • 材料與方法17-23
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)17
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)藥物17
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)病毒及菌株17
  • 1.4 實(shí)驗(yàn)主要試劑17
  • 1.5 實(shí)驗(yàn)主要儀器17-18
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法18-22
  • 2.1 動(dòng)物分組18
  • 2.2 動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境18
  • 2.3 免疫低下肺部感染小鼠模型的制備過(guò)程18-19
  • 2.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥方法19-20
  • 2.5 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集20
  • 2.6 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)20-22
  • 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理22-23
  • 結(jié)果23-32
  • 1 各組實(shí)驗(yàn)小鼠一般情況的改變23
  • 2 清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠免疫器官的影響23-26
  • 3 清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響26-27
  • 4 清肺培元顆粒對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清Th1、Th2細(xì)胞因子的影響27-30
  • 5 實(shí)驗(yàn)小鼠肺組織病理改變30-32
  • 討論32-41
  • 1 理論研究探討32-34
  • 2 對(duì)HIV/AIDS肺部感染的認(rèn)識(shí)34-35
  • 3 免疫低下肺部感染動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的相關(guān)研究35-36
  • 4 清肺培元顆粒組方及解析36-37
  • 5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析37-40
  • 6 不足之處與未來(lái)展望40-41
  • 結(jié)語(yǔ)41-42
  • 參考文獻(xiàn)42-46
  • 附錄46-56
  • 附錄1 病理圖片46-48
  • 附錄2 流式細(xì)胞圖48-50
  • 附錄3 Th1、Th2細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)曲線圖50-52
  • 附錄4 文獻(xiàn)綜述 免疫低下肺部感染中醫(yī)藥治療研究現(xiàn)狀52-56
  • 參考文獻(xiàn)55-56
  • 附錄5 在校期間論文論著和科研情況56

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):904794

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