本文關(guān)鍵詞：Fonsecaea monophora多聚酮合酶基因的擴增及敲除載體的構(gòu)建

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【摘要】：目的擴增Fonsecaea monophora中控制黑素合成的多聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)基因并測序,構(gòu)建PKS基因敲除載體。方法擴增PKS基因,根據(jù)測序結(jié)果設計引物,從Fonsecaea monophora基因組DNA擴增PKS基因5’-同源臂和3’-同源臂,從質(zhì)粒pBHt1中擴增潮霉素B抗性標記基因(hyg),最后將各片段插入載體PDHt/sk中。結(jié)果測序得到5 389bp大小的PKS基因序列,構(gòu)建了PKS基因的敲除載體,用酶切及測序等方法鑒定載體構(gòu)建成功。結(jié)論成功構(gòu)建Fonsecaea monophora PKS基因敲除載體,為研究PKS基因及黑素的生物學功能奠定了良好的基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院皮膚科;吉林大學基礎(chǔ)醫(yī)學院病原生物學系吉林大學真菌研究中心·教育部人獸共患病重點實驗室;廣東省疾病預防控制中心;
【關(guān)鍵詞】： Fonsecaea monophora 多聚酮合酶基因 根癌農(nóng)桿菌 載體構(gòu)建
【基金】：國家自然科學基金(81571970)
【分類號】：R3416
【正文快照】： [Chin J Mycol,2016,11(2):70-74]黑素是一類常見于微生物和動植物體內(nèi)的非均質(zhì)、高分子量、多功能、結(jié)構(gòu)復雜的聚合體,具有帶負電荷、疏水、不溶于酸和大部分有機溶劑等特點。黑素是真菌細胞壁的重要成分,具有吸收紫外線、抗氧化、抗溶菌酶、增強病原真菌表面的黏附性,抵御宿

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