第一部分脂聯(lián)素受體在正常SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞的分布和表達(dá) 目的：研究脂聯(lián)素受體1（AdipoR1）和脂聯(lián)素受體2（AdipoR2）及T-鈣黏蛋白（T-cadherin，T-cad），三種脂聯(lián)素受體在大鼠乳鼠心肌細(xì)胞上的分布和表達(dá)。 方法： 1.利用酶消化法、差速貼壁法、化學(xué)試劑(5-brdu)抑制法培養(yǎng)原代的乳鼠心肌細(xì)胞，采用α-肌動(dòng)蛋白細(xì)胞免疫熒光法對(duì)培養(yǎng)的心肌細(xì)胞進(jìn)行鑒定，然后在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、細(xì)胞形態(tài)和其自發(fā)搏動(dòng)。 2.選用原代培養(yǎng)72～96h的單層原代心肌細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，采用RT-PCR和細(xì)胞免疫組織化學(xué)法檢測(cè)AdipoR1、AdipoR2和T-cadherin的mRNA和蛋白的表達(dá)及分布。 結(jié)果： 1.經(jīng)細(xì)胞免疫組織化學(xué)法鑒定培養(yǎng)的原代細(xì)胞為心肌細(xì)胞，且其純度可達(dá)95%以上； 2.在SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞上均檢測(cè)到了AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白表達(dá)，其中以AdipoR1和T-cadherin的mRNA和蛋白表達(dá)量高，與AdipoR2的表達(dá)量相比差異顯著（P<0.01）。 結(jié)論： 1.脂聯(lián)素受體1、脂聯(lián)...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 脂聯(lián)素受體在正常 SD 大鼠乳鼠心肌細(xì)胞上的分布和表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 心肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.2 鑒定心肌細(xì)胞
        1.3 正常單層細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
        1.4 觀察指標(biāo)
        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    結(jié)果
        1.6 細(xì)胞的形態(tài)特征、鑒定
        1.7 RT-PCR 檢測(cè) AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的 mRNA 表達(dá)結(jié)果
        1.8 免疫組織化學(xué)方法檢測(cè) AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的蛋白表達(dá)結(jié)果
    討論
第二部分 脂聯(lián)素對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷后 AdipoR1、AdipoR2 及 T-cadherin 表達(dá)的影響
    2 材料與方法
        2.1 心肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 乳鼠心室肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定
        2.3 實(shí)驗(yàn)分組情況
        2.4 觀察指標(biāo)和檢測(cè)方法
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    結(jié)果
        2.6 倒置相差顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)觀察：
        2.7 各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞上清液中 LDH 釋放量比較
        2.8 心肌細(xì)胞凋亡率
        2.9 TUNEL 法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡結(jié)果
        2.10 RT-PCR 檢測(cè) AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的 mRNA 表達(dá)
        2.11 Western blot 檢測(cè) AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的蛋白表達(dá)
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：4049427