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Coronin-1siRNA在巨噬細胞中的特異性表達及抗恥垢分枝桿菌感染的實驗研究

發(fā)布時間:2023-05-13 05:18
  目的:巨噬細胞Coronin-1(冠蛋白-1)與Mtb(結(jié)核分枝桿菌)逃逸巨噬細胞的殺傷有關(guān)。本研究構(gòu)建巨噬細胞特異性SP107-C3啟動子調(diào)控表達Coronin-1 si RNA的p S-EGFP-SP-Coronin-1質(zhì)粒,研究其特異性敲減巨噬細胞Coronin-1蛋白對RAW264.7小鼠巨噬細胞的吞噬功能及抗恥垢分枝桿菌效應(yīng)的影響。方法:1.構(gòu)建pS-EGFP-SP-EGFP、pS-EGFP-SP-Coronin-1重組質(zhì)粒,分別轉(zhuǎn)染RAW264.7、A549及HEK293細胞,檢測其巨噬細胞特異性啟動表達si RNA的能力。2.以pS-EGFP-SP-Coronin-1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染RAW264.7細胞,用RT-PCR法和Western-blot兩種方法檢測重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染前后的RAW264.7細胞Coronin-1的表達水平,明確重組質(zhì)粒敲減Coronin-1的效率。3.用恥垢分枝桿菌分別感染pS-EGFP-SP-Coronin-1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞、pS-EGFP-SP空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞和空白RAW264.7細胞,通過感染細胞內(nèi)恥垢分枝桿菌菌落總數(shù)評估巨噬細胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒前后對細菌的吞...

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對照
摘要
Abstract
前言
第一部分 重組質(zhì)粒構(gòu)建
    1.材料和方法
    2.結(jié)果與分析
    3.結(jié)論
第二部分 重組質(zhì)粒功能鑒定
    1.材料和方法
    2.結(jié)果與分析
    3.結(jié)論
第三部分 重組質(zhì)!凹毎健笨狗种U菌的研究
    1.材料和方法
    2.結(jié)果與分析
    3.結(jié)論
全文討論
全文總結(jié)
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
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