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miR-33調(diào)控單核細(xì)胞系炎癥因子TNF-α及IL-6表達(dá)的研究

發(fā)布時間:2023-05-08 00:21
  目的研究microRNA-33(miR-33)靶向人核受體相互作用蛋白1(NRIP1)負(fù)性調(diào)控脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的人單核細(xì)胞(THP-1)巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)。方法體外培養(yǎng)THP-1,設(shè)立:1)空白對照組(等量磷酸鹽緩沖液);2)miR-33 mimics轉(zhuǎn)染對照組(轉(zhuǎn)染模擬miR-33 mimics);3)miR-33 mimics轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染miR-33 mimics);4)miR-33 inhibitor轉(zhuǎn)染對照組(轉(zhuǎn)染模擬miR-33 inhibitor);5)miR-33 inhibitor轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染miR-33 inhibitor)。采用10.0 ng·mL-1 LPS刺激各組細(xì)胞24 h;實時熒光定量PCR法檢測細(xì)胞miR-33表達(dá);Western印跡法檢測細(xì)胞NRIP1蛋白表達(dá);ELISA法檢測細(xì)胞TNF-α、IL-6含量。結(jié)果 miR-33 mimics轉(zhuǎn)染組細(xì)胞NRIP1蛋白表達(dá)顯著減少,TNF-α、IL-6分泌也顯著降低(P<0.05);miR-33 inhibitor轉(zhuǎn)染組細(xì)胞NRIP1蛋白表達(dá)顯著增加,TNF-α、IL-6含量也顯著...

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞與試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 實時熒光定量
    1.5 Western Blot檢測NRIP1蛋白表達(dá)
    1.6 ELISA法檢測TNF-α、IL-6的表達(dá)
    1.7 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 miRNA-33細(xì)胞中表達(dá)變化
    2.2 Western blot檢測細(xì)胞NRIP1的蛋白表達(dá)
    2.3 miR-33對THP-1細(xì)胞釋放炎癥因子的影響
3 討論



本文編號:3811616

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