雙波長微孔板賴氏法檢測人血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量的方法學(xué)驗證
發(fā)布時間:2021-12-11 04:42
目的采用雙波長(492 nm/630 nm)微孔板賴氏法檢測人血漿中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase, ALT)的含量,并對該方法進行系統(tǒng)性的評價。方法按照ALT測定試劑盒的要求加樣,應(yīng)用雙波長(492 nm/630 nm)微孔板賴氏法測定人血漿中的ALT含量,并對檢測系統(tǒng)的專屬性、線性范圍、準確度和精密度進行驗證。結(jié)果專屬性分析結(jié)果顯示,血漿樣品與不同比例的抗凝劑混合,其中的ALT均能有效被檢出,回收率分別為100%、95%和90%;對28和150個單位丙酮酸鈉標準溶液進行倍比稀釋5個梯度以制作標準曲線,采用多項式對標準曲線進行擬合,結(jié)果顯示丙酮酸鈉標準溶液分別在9.375~150、1.75~28和1.75~150個單位范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好,相關(guān)系數(shù)r均達到0.99以上;準確度檢測結(jié)果顯示,已知含量的廠家質(zhì)控血清和國家能力驗證樣品的實測值和理論值相比,回收率均在90%~110%之間;同一樣品,重復(fù)加樣18孔,重復(fù)性檢測結(jié)果變異系數(shù)(CV)為5.29%;兩位試驗人員在不同日期對同一樣品重復(fù)測定6次,中間精密度檢測結(jié)果變異系數(shù)為5.49%。結(jié)論該檢測方法...
【文章來源】:微生物學(xué)免疫學(xué)進展. 2020,48(01)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
第一板加樣情況
確認血液制品生產(chǎn)用人血漿ALT賴氏法-微孔板測定的準確性是否符合要求。選擇已知含量的質(zhì)控血清20160612和能力驗證樣品(1671、1672、1673、1674、1675),每份樣品重復(fù)加樣3孔,計算CV,CV應(yīng)<10%;并將實測值與理論值比較,回收率應(yīng)在90%~110%。加樣位置見圖2。1.7 精密度
表2 線性范圍確認檢測結(jié)果Tab.2 Confirmation test for linear range 丙酮酸鈉標準溶液理論含量/卡門單位 A492 nm/630 nm 值 均值 CV/% 1 2 3 150 0.840 0 0.845 3 0.843 5 0.8429 0.32 75 0.652 2 0.650 3 0.650 7 0.651 1 0.15 37.5 0.520 0 0.515 0 0.516 7 0.517 2 0.49 18.75 0.452 3 0.457 3 0.449 0 0.452 9 0.92 9.375 0.420 0 0.415 8 0.418 3 0.418 0 0.51 28 0.493 7 0.497 5 0.496 8 0.496 0 0.41 14 0.438 3 0.437 5 0.437 1 0.437 6 0.14 7 0.410 4 0.407 3 0.405 7 0.407 8 0.59 3.5 0.388 1 0.391 2 0.391 1 0.390 1 0.45 1.75 0.379 9 0.380 2 0.380 7 0.380 3 0.112.3 準確度
【參考文獻】:
期刊論文
[1]雙波長微板賴氏法檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶方法的優(yōu)化[J]. 郝春玉,葉小書,袁攀,曾浪霞,牟嘉煒,何學(xué)新,段艷,張燕. 中國生物制品學(xué)雜志. 2017(02)
[2]ALT微量賴氏法中NaOH濃度的選擇與應(yīng)用[J]. 徐鶴新. 中國輸血雜志. 2004(04)
[3]微量滴定板改良賴氏試管法檢測血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶[J]. 韓曉忠,宋青,耿鳳軍. 中國生化藥物雜志. 2004(01)
[4]雙波長微板賴氏法自動化檢測ALT的研究[J]. 邢培清,劉玉振,方建華,溫濤,李伍升. 河南醫(yī)學(xué)研究. 2002(04)
本文編號:3534028
【文章來源】:微生物學(xué)免疫學(xué)進展. 2020,48(01)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
第一板加樣情況
確認血液制品生產(chǎn)用人血漿ALT賴氏法-微孔板測定的準確性是否符合要求。選擇已知含量的質(zhì)控血清20160612和能力驗證樣品(1671、1672、1673、1674、1675),每份樣品重復(fù)加樣3孔,計算CV,CV應(yīng)<10%;并將實測值與理論值比較,回收率應(yīng)在90%~110%。加樣位置見圖2。1.7 精密度
表2 線性范圍確認檢測結(jié)果Tab.2 Confirmation test for linear range 丙酮酸鈉標準溶液理論含量/卡門單位 A492 nm/630 nm 值 均值 CV/% 1 2 3 150 0.840 0 0.845 3 0.843 5 0.8429 0.32 75 0.652 2 0.650 3 0.650 7 0.651 1 0.15 37.5 0.520 0 0.515 0 0.516 7 0.517 2 0.49 18.75 0.452 3 0.457 3 0.449 0 0.452 9 0.92 9.375 0.420 0 0.415 8 0.418 3 0.418 0 0.51 28 0.493 7 0.497 5 0.496 8 0.496 0 0.41 14 0.438 3 0.437 5 0.437 1 0.437 6 0.14 7 0.410 4 0.407 3 0.405 7 0.407 8 0.59 3.5 0.388 1 0.391 2 0.391 1 0.390 1 0.45 1.75 0.379 9 0.380 2 0.380 7 0.380 3 0.112.3 準確度
【參考文獻】:
期刊論文
[1]雙波長微板賴氏法檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶方法的優(yōu)化[J]. 郝春玉,葉小書,袁攀,曾浪霞,牟嘉煒,何學(xué)新,段艷,張燕. 中國生物制品學(xué)雜志. 2017(02)
[2]ALT微量賴氏法中NaOH濃度的選擇與應(yīng)用[J]. 徐鶴新. 中國輸血雜志. 2004(04)
[3]微量滴定板改良賴氏試管法檢測血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶[J]. 韓曉忠,宋青,耿鳳軍. 中國生化藥物雜志. 2004(01)
[4]雙波長微板賴氏法自動化檢測ALT的研究[J]. 邢培清,劉玉振,方建華,溫濤,李伍升. 河南醫(yī)學(xué)研究. 2002(04)
本文編號:3534028
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