本文關(guān)鍵詞：呼吸道感染細(xì)菌聯(lián)合疫苗制備及免疫效果評(píng)價(jià)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研制我國(guó)小兒常見(jiàn)呼吸道感染細(xì)菌聯(lián)合疫苗,分別對(duì)其進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)與動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究。通過(guò)檢測(cè)免疫細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子生成、細(xì)胞表型變化、小鼠細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能、吞噬細(xì)胞功能和臟器指數(shù)等一系列特異性免疫功能及非特異性免疫功能的免疫學(xué)指標(biāo),探討此聯(lián)合疫苗對(duì)機(jī)體免疫功能的影響,進(jìn)一步確定其影響機(jī)體免疫系統(tǒng)的機(jī)制,為研制我國(guó)呼吸道感染細(xì)菌聯(lián)合疫苗提供理論依據(jù)。方法1制備聯(lián)合疫苗分離培養(yǎng)我國(guó)小兒呼吸道感染常見(jiàn)6種細(xì)菌(溶血性鏈球菌、流感嗜血桿菌B型、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌),用生理鹽水洗細(xì)菌三次,然后超聲波破碎細(xì)菌,用飽和硫酸銨沉淀細(xì)菌蛋白,再通過(guò)透析膜去除硫酸銨,分光光度計(jì)測(cè)定蛋白含量,作為抗原。將抗原混合后用生理鹽水配置成一定濃度作為聯(lián)合疫苗。2體外實(shí)驗(yàn)1)用CCK-8法檢測(cè)聯(lián)合疫苗對(duì)人淋巴細(xì)胞增殖活性的影響。2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-2(IL-2)和干擾素-γ(IFN-γ)含量;3)流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)細(xì)胞表型變化。3體內(nèi)實(shí)驗(yàn)取SPF級(jí)小鼠40只,隨機(jī)分成四組:正常對(duì)照組(NC),聯(lián)合疫苗1組,聯(lián)合疫苗2組,聯(lián)合疫苗3組,每組10只。全部實(shí)驗(yàn)小鼠飼喂基礎(chǔ)日糧,適應(yīng)性喂養(yǎng)10天后,分別用濃度為0.1mg"ml,0.2mg"ml,0.4mg"ml聯(lián)合疫苗免疫1組,2組,3組小鼠,每天上午灌服0.2ml。NC組小鼠每天灌服0.2ml生理鹽水。免疫10天。然后將小鼠處死,進(jìn)行免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。1)測(cè)定聯(lián)合疫苗組小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能。2)觀察聯(lián)合疫苗對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能(遲發(fā)型超敏反應(yīng),DTH)的影響。3)檢測(cè)聯(lián)合疫苗組小鼠血清中溶血素含量的變化。4)觀察聯(lián)合疫苗對(duì)小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的影響。結(jié)果1人外周血淋巴細(xì)胞增殖活性檢測(cè)結(jié)果顯示:各濃度聯(lián)合疫苗組OD值均高于對(duì)照組,均對(duì)外周血淋巴細(xì)胞起增殖作用(P0.05),最佳濃度為50μg/ml。2細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2檢測(cè)結(jié)果顯示:各濃度聯(lián)合疫苗組IFN-γ、IL-2值均高于對(duì)照組(P0.05,P0.01)。最佳濃度為50μg/ml,高于此濃度時(shí),細(xì)胞因子含量開(kāi)始降低。3流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD3+細(xì)胞和CD19+細(xì)胞的結(jié)果顯示:聯(lián)合疫苗組CD3+細(xì)胞數(shù)與CD19+細(xì)胞數(shù)均高于對(duì)照組(P0.01)。4小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能檢測(cè)結(jié)果顯示:對(duì)照組巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)分別為22.5±1.95和0.32±0.20;聯(lián)合疫苗組均顯著高于正常對(duì)照組(P0.01)。5小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)檢測(cè)結(jié)果顯示:聯(lián)合疫苗組左右后足重量差分別為21.60±2.07mg、23.36±2.65mg、25.63±3.02mg,顯著高于正常對(duì)照組的16.50±2.12mg(P0.01)。6血清溶血素含量結(jié)果顯示:對(duì)照組溶血素吸光度值為0.205±0.023,各濃度聯(lián)合疫苗組溶血素吸光度值分別為0.219±0.018,0.236±0.022,0.258±0.015,均高于對(duì)照組(P0.01)。7各濃度聯(lián)合疫苗組與對(duì)照組相比,脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)均顯著增高(P0.01)。結(jié)論1制備的聯(lián)合疫苗可提高機(jī)體免疫功能。2聯(lián)合疫苗不僅能提高體液免疫功能,對(duì)細(xì)胞免疫功能也具有明顯影響。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)菌 聯(lián)合疫苗 細(xì)胞免疫 體液免疫 IFN-γ IL-2
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R392.12
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-11
• 第1章 實(shí)驗(yàn)研究11-31
• 1.1 材料與方法11-16
• 1.1.1 主要試劑11
• 1.1.2 主要儀器設(shè)備11-12
• 1.1.3 菌種來(lái)源12
• 1.1.4 血液標(biāo)本來(lái)源12
• 1.1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12-13
• 1.1.6 聯(lián)合疫苗的制備13
• 1.1.7 體外實(shí)驗(yàn)13-14
• 1.1.8 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)14-15
• 1.1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析15-16
• 1.2 結(jié)果16-22
• 1.2.1 體外實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果16-19
• 1.2.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果19-22
• 1.3 討論22-27
• 1.3.1 聯(lián)合疫苗對(duì)人外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響23-24
• 1.3.2 聯(lián)合疫苗對(duì)淋巴細(xì)胞亞群影響24
• 1.3.3 聯(lián)合疫苗對(duì)細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ生成的影響24-25
• 1.3.4 聯(lián)合疫苗對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響25
• 1.3.5 聯(lián)合疫苗對(duì)細(xì)胞免疫功能（遲發(fā)型超敏反應(yīng)，DTH）的影響25-26
• 1.3.6 聯(lián)合疫苗對(duì)小鼠血清溶血素含量的影響26
• 1.3.7 聯(lián)合疫苗對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響26-27
• 1.4 小結(jié)27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 第2章 綜述31-46
• 2.1 聯(lián)合疫苗的發(fā)展簡(jiǎn)史31-32
• 2.2 聯(lián)合疫苗的概況32-39
• 2.2.1 以DTP為主的聯(lián)合疫苗32-34
• 2.2.2 麻疹、風(fēng)疹、腮腺炎聯(lián)合疫苗（MMR）34-35
• 2.2.3 甲肝、乙肝聯(lián)合疫苗（hepatitis A-hepatitis B, HepA-Hep B）35
• 2.2.4 甲型肝炎-傷寒聯(lián)合疫苗35-36
• 2.2.5 肺炎球菌疫苗36-37
• 2.2.6 腦膜炎球菌多價(jià)疫苗37
• 2.2.7 輪狀病毒疫苗37-38
• 2.2.8 新型聯(lián)合疫苗38-39
• 2.2.9 其他聯(lián)合疫苗39
• 2.3 存在的問(wèn)題39-41
• 2.3.1 聯(lián)合疫苗的穩(wěn)定性39-40
• 2.3.2 聯(lián)合疫苗的有效性40
• 2.3.3 聯(lián)合疫苗的安全性40-41
• 2.4 展望41
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 結(jié)論46-47
• 致謝47-48
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介48-49
• 作者簡(jiǎn)介49-50
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集50

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：呼吸道感染細(xì)菌聯(lián)合疫苗制備及免疫效果評(píng)價(jià)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：346986