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建立在體角膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷后再生動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-26 23:27
  目的探討建立在體角膜內(nèi)皮損傷動(dòng)物模型的方法及其損傷后再生的潛能。方法選取2周齡的正常六角龍魚30只。采用數(shù)字表法隨機(jī)分為正常觀察組、NaOH損傷組及機(jī)械損傷組,各10只。采用活體共聚焦顯微鏡檢查、組織病理學(xué)檢查、茜素紅-曲利苯藍(lán)內(nèi)皮染色和氯化金角膜神經(jīng)染色等方法觀察。對(duì)正常觀察組六角龍魚,觀察其眼球和角膜正常結(jié)構(gòu);通過NaoH溶液和器械兩種方法損傷角膜內(nèi)皮層,建立角膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型,觀察其角膜內(nèi)皮細(xì)胞再生的情況。對(duì)4個(gè)時(shí)間點(diǎn)角膜內(nèi)皮細(xì)胞的密度進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn),使用重復(fù)測量方差分析對(duì)不同組別、不同時(shí)間點(diǎn)角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度的均值進(jìn)行比較,事前進(jìn)行Mauchly球形檢驗(yàn),如果檢驗(yàn)結(jié)果顯著,采用多元方差分析,否則選用校正自由的F檢驗(yàn)。結(jié)果六角龍魚角膜厚度約為(75.75±7.51)μm,角膜上皮細(xì)胞層較厚,約占角膜厚度的一半。經(jīng)NaoH溶液和器械兩種方法損傷其角膜內(nèi)皮細(xì)胞后,六角龍魚角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度明顯降低。NaoH損傷組和機(jī)械損傷組在不同時(shí)間點(diǎn),六角龍魚角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度的比較,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=31.38,51.77;P<0.05)。而各個(gè)時(shí)間點(diǎn)間的差異,兩組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意... 

【文章來源】:中華眼科醫(yī)學(xué)雜志(電子版). 2019,9(05)

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

建立在體角膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷后再生動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究


圖5兩個(gè)角膜內(nèi)皮損傷組六角龍魚角膜內(nèi)皮細(xì)

機(jī)械破壞,共聚焦顯微鏡,損傷后,活體


·302·中華眼科醫(yī)學(xué)雜志(電子版)2019年8月第9卷第5期ChinJOphthalmolMed(ElectronicEdition),October2019,Vol.9,No.5圖3六角龍魚角膜內(nèi)皮損傷動(dòng)物模型的建立過程外觀圖像圖3A顯示使用糖尿病針注射器眼角膜緣將針頭刺入角膜前房,進(jìn)行NaoH破壞內(nèi)皮細(xì)胞或者機(jī)械破壞內(nèi)皮細(xì)胞;圖3B顯示NaoH溶液注射入前房后外眼像(×40);圖3C顯示機(jī)械破壞角膜內(nèi)皮層后外眼像(×40)圖4六角龍魚角膜內(nèi)皮損傷后不同時(shí)間點(diǎn)活體共聚焦顯微鏡下的顯微圖像圖4A、4B、4C、4D顯示NaoH損傷組角膜內(nèi)皮經(jīng)損傷后不同時(shí)間點(diǎn)活體共聚焦顯微鏡下觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)及密度變化(×800);圖4E、4F、4G、4H顯示機(jī)械損傷組角膜內(nèi)皮經(jīng)損傷后活體共聚焦顯微鏡觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)及密度變化(×800)表1正常觀察組與損傷前后NaoH損傷組及機(jī)械損傷組六角龍魚角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度的比較(x珋±s,個(gè)/mm2)分組數(shù)量(只)損傷前損傷后3d損傷后7d損傷后14d正常觀察組10271±39NaoH損傷組10283±36128±14a157±20ab198±17abc機(jī)械損傷組10259±16113±11a169±19ab223±17abc注:a、b、c分別示與損傷前、損傷后3d及損傷后14d的比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)圖5兩個(gè)角膜內(nèi)皮損傷組六角龍魚角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度損傷后隨時(shí)間變化的情況討論角膜內(nèi)皮再生一直以來都是眼科醫(yī)師關(guān)注的熱點(diǎn)。有研究證實(shí),人眼角膜內(nèi)皮細(xì)胞并非無增殖的潛能,只不過在體內(nèi)有絲分裂的細(xì)胞周期循環(huán)被抑制在了G1期[1,13-15]。一、離體和在體角膜內(nèi)皮再生實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究的現(xiàn)狀有研究發(fā)現(xiàn),紫紅質(zhì)蛋白激酶抑制劑Y27632可?


本文編號(hào):3365170

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