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miR-208b對小鼠HL-1房顫細(xì)胞鈣超載的影響及其機(jī)制分析

發(fā)布時(shí)間:2021-08-12 13:25
  目的探討miR-208b對小鼠HL-1房顫細(xì)胞鈣超載的影響,并分析其作用機(jī)制。方法將小鼠HL-1心房肌細(xì)胞隨機(jī)分為3組:對照組、起搏組和miR-208b組。后兩組建立快速起搏HL-1房顫細(xì)胞模型,然后將miR-208b模擬物轉(zhuǎn)染至miR-208b組細(xì)胞,將模擬物陰性對照轉(zhuǎn)染至起搏組細(xì)胞,對照組不處理。全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)檢測動(dòng)作電位時(shí)程(APD)及L型鈣電流(ICa,L)的電流密度,實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western Blot檢測鈣通道蛋白mRNA及蛋白的表達(dá)。結(jié)果與對照組相比,起搏組和miR-208b組細(xì)胞中miR-208b表達(dá)顯著增加(P <0. 05),且miR-208b組高于起搏組(P <0. 05)。與對照組相比,起搏組和miR-208b組APD50、APD90、ICa,L的電流密度、CACNA1C mRNA、CACNB2 mRNA、CaV1. 2蛋白、SERCA2 mRNA及SERCA2蛋白的表達(dá)均顯著降低(P <0. 05),且miR-208b組低于起搏組(P <0. 05)。結(jié)論 miR-208b在小鼠HL... 

【文章來源】:臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2019,18(20)

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
    1.2 房顫細(xì)胞模型建立[5]
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)
    1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測
    1.6 Western Blot
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 各組細(xì)胞miR-208b的表達(dá)
    2.2 各組細(xì)胞動(dòng)作電位時(shí)程的對比
    2.3 各組細(xì)胞內(nèi)L型鈣離子電流的變化
    2.4 各組細(xì)胞內(nèi)L型鈣離子通道亞基(CACNA1C和CACNB2)的表達(dá)
    2.5 各組細(xì)胞內(nèi)肌漿網(wǎng)鈣泵(SERCA2)的表達(dá)
3 討論
4 結(jié)論



本文編號:3338401

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