漢坦病毒（Hantavirus）可引起兩種急性病毒性傳染�。阂环N是漢坦病毒肺綜合征（Hantavirus pulmonary syndrome，HPS），另一種是腎綜合征出血熱（hemorrhagicfever with renal syndrome, HFRS）。其中，HFRS在我國流行范圍廣，發(fā)病率高，病死率也較高；另外，HFRS的傳染源和宿主動物廣泛，可通過多種途徑傳播，其防治任務(wù)十分艱巨。但由于HFRS的發(fā)病機制較為復(fù)雜，有些環(huán)節(jié)尚未研究清楚，使臨床缺乏特效治療藥物，目前使用的滅活疫苗也存在不足，因此加強漢坦病毒相關(guān)的基礎(chǔ)研究十分必要。漢坦病毒包膜糖蛋白（Glycoprotein，GP）能誘導(dǎo)病毒與宿主細胞發(fā)生膜融合，能刺激機體產(chǎn)生中和抗體，對感染動物或HFRS患者有一定的保護作用，與病毒的致病性及誘發(fā)機體產(chǎn)生抗病毒免疫等均有密切關(guān)系，是漢坦病毒研究中最受關(guān)注的蛋白之一。漢坦病毒Gn、Gc上均存在保守的N-糖基化位點。國內(nèi)外對一些病毒的研究表明，N-糖基化對糖蛋白自身的轉(zhuǎn)運、折疊，對抗原決定簇的結(jié)構(gòu)、功能以及對病毒顆粒的成熟、毒力和免疫逃避等均有重要作用。但目前對漢坦病毒GP糖... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
文獻回顧
    一、漢坦病毒包膜糖蛋白研究進展
        1.漢坦病毒的分類及基因組結(jié)構(gòu)
        2.漢坦病毒顆粒及其組成
        3.漢坦病毒 GP 的分子生物學特性
    二、N-糖基化對病毒包膜糖蛋白功能影響的研究進展
        1.糖基化對相關(guān)病毒包膜糖蛋白結(jié)構(gòu)與功能的影響
        2.糖基化對漢坦病毒包膜糖蛋白結(jié)構(gòu)與功能的影響
        3.病毒包膜糖蛋白糖基化與蛋白功能研究的常用方法
    三、假病毒的研究進展
        1.假病毒在體內(nèi)定向傳遞基因的應(yīng)用研究
        2.假病毒在病毒受體及穿入過程研究中的應(yīng)用
        3.假病毒在中和抗體研究中的應(yīng)用
    四、慢病毒載體的研究進展
        1.慢病毒載體的分子改造
        2.慢病毒載體的安全性
        3.慢病毒載體的應(yīng)用
    五、凝集素芯片技術(shù)在糖組學分析研究中的應(yīng)用進展
        1. 凝集素芯片的基本原理
        2. 用于糖鏈分析的主要凝集素
        3. 凝集素芯片在糖組學研究中的應(yīng)用
第一部分 含漢灘病毒M 基因或其糖基化位點突變基因重組假病毒的構(gòu)建及其糖鏈結(jié)構(gòu)的比較研究
    1 材料
        1.1 細菌及載體
        1.2 凝集素芯片
        1.3 細胞
        1.4 工具酶
        1.5 主要試劑
        1.6 培養(yǎng)基
        1.7 常用緩沖液系統(tǒng)
        1.8 主要儀器和器材
    2 方法
        2.1 HTNV Gn、Gc 編碼基因即 M 片段的獲得
        2.2 HTNV Gn、Gc 編碼基因糖基化位點的突變
        2.3 含 HTNV M 基因或其糖基化位點突變基因表達載體的構(gòu)建及鑒定
        2.4 含 HTNV M 基因或其糖基化位點突變基因重組假病毒的包裝
        2.5 重組假病毒的滴度測定
        2.6 重組假病毒糖鏈結(jié)構(gòu)的檢測
        2.7 實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計與分析
    3 結(jié)果
        3.1 HTNV Gn、Gc 編碼基因即 M 片段的獲得
        3.2 HTNV Gn、Gc 糖基化位點的突變
        3.3 含 HTNV M 基因或其糖基化位點突變基因表達載體的鑒定結(jié)果
        3.4 含 HTNV M 基因或其糖基化位點突變基因重組假病毒的包裝
        3.5 重組假病毒的滴度測定結(jié)果
        3.6 重組假病毒的蛋白定量結(jié)果
        3.7 重組假病毒的凝集素芯片檢測結(jié)果
    4 討論
        4.1 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點突變基因的重組假病毒的包裝
        4.2 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點突變基因的重組假病毒糖鏈結(jié)構(gòu)的比較
第二部分 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點突變基因的重組假病毒感染性及免疫學特性比較研究
    1 材料
        1.1 細胞
        1.2 病毒
        1.3 動物
        1.4 抗體及主要試劑
        1.5 培養(yǎng)基
        1.6 主要儀器和器材
        1.7 其他常用試劑、緩沖液
    2 方法
        2.1 含 HTNV M 基因或其糖基化位點突變基因重組假病毒感染活性的比較
        2.2 免疫動物
        2.3 免疫小鼠血清中特異性抗體的檢測
        2.4 微量細胞培養(yǎng)中和試驗檢測免疫小鼠血清中和抗體
        2.5 免疫小鼠細胞因子的檢測
        2.6 重組假病毒免疫動物保護試驗
        2.7 實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計與分析
    3 結(jié)果
        3.1 含 HTNV M 基因或其糖基化位點突變基因重組假病毒感染活性的比較結(jié)果
        3.2 免疫小鼠血清中特異性抗體的檢測結(jié)果
        3.3 免疫小鼠血清中和抗體的檢測結(jié)果
        3.4 免疫小鼠細胞因子的檢測結(jié)果
        3.5 重組假病毒免疫動物保護試驗結(jié)果
    4 討論
        4.1 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點突變基因的重組假病毒感染性的比較
        4.2 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點突變基因的重組假病毒免疫原性的比較
        4.3 重組假病毒免疫對 HTNV 感染小鼠的保護作用
小結(jié)
參考文獻
個人簡歷和研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]凝集素芯片技術(shù)在常見婦科腫瘤診斷中的應(yīng)用[J]. 裴麗麗,肖超強,何為.  安徽醫(yī)科大學學報. 2013(11)
[2]凝集素芯片在糖鏈結(jié)構(gòu)變化檢測中的應(yīng)用[J]. 程莉,周樹敏,郭書娟,陶生策.  生命的化學. 2013(03)
[3]N-糖基化對乙型腦炎病毒prME和NS1基因免疫效果影響的研究[J]. 張子重,汪雪,宰俊杰,孫樂強,宋云峰,陳煥春.  病毒學報. 2012(03)
[4]N-糖基化對乙型腦炎病毒感染與增殖的影響[J]. 張子重,汪雪,宋云峰,陳煥春.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報. 2012(03)
[5]慢病毒載體的研究進展及應(yīng)用[J]. 陳彩云,劉亞京,牛忠英.  口腔頜面修復(fù)學雜志. 2012(02)
[6]慢病毒載體的發(fā)展歷程及現(xiàn)狀[J]. 柏琦,那鑫妮,馮姍姍.  中國醫(yī)藥指南. 2011(23)
[7]豆科凝集素研究進展[J]. 殷曉麗,李婷婷,劉東亮,王燕,孫素榮.  中國生物工程雜志. 2011(07)
[8]流感病毒糖蛋白糖鏈的作用和功能研究[J]. 孫士生,王秦哲,李錚.  中國科學:化學. 2011(03)
[9]漢坦病毒包膜糖蛋白重組表達研究進展[J]. 呼延霆,薛小平,宋凱,汪樺.  實用醫(yī)學雜志. 2009(20)
[10]蓖麻凝集素研究進展(綜述)[J]. 楊華東,袁偉華,歐陽雪君.  亞熱帶植物科學. 2009(03)



本文編號：3305520