目的探討經(jīng)靜脈回輸用Edu標(biāo)記的自身骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能否擴(kuò)增分化成為肺組織中的氣道上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等,修復(fù)受損的肺組織,重建肺功能。方法1.選健康雄性新西蘭大白兔2.7³.5kg、32只,分成27只造模組和5只健康對(duì)照組。采用胰蛋白酶（2.5g/100ml 0.9%Nacl）霧化方法構(gòu)建肺氣腫模型,每周霧化一次,連續(xù)霧化4周后繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)12周。造模結(jié)束后,通過(guò)肺雙源CT計(jì)算平均肺容積,對(duì)比造模前、開始造模后8周、16周平均肺容積變化;采用對(duì)比造模組與健康組肺組織大體標(biāo)本、HE病理變化來(lái)驗(yàn)證肺氣腫模型的建立。2.隨機(jī)抽取18只模型兔隨機(jī)分成6組,每組3只。分別為:模型對(duì)照組、抗氧化組、低劑量干細(xì)胞治療組、低劑量干細(xì)胞聯(lián)合抗氧化治療組、高劑量干細(xì)胞治療組、高劑量干細(xì)胞聯(lián)合抗氧化治療組;選取擬定行干細(xì)胞治療的12只模型兔,在脛骨處各抽取0.5ml骨髓液（每只兔子骨髓液進(jìn)行編號(hào)標(biāo)記,以便分別培養(yǎng)、擴(kuò)增、Edu染色,然后自身回輸）,采用骨髓貼壁法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。當(dāng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)至第三代時(shí),將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與10u M Edu共孵育48小時(shí),抽取100u... 

【文章來(lái)源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

新西蘭大白兔正常肺組織大體標(biāo)本：顏色為均一褐紅色，肺組織結(jié)構(gòu)完整；

1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況造模前：各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物精神良好，毛發(fā)光亮、潔白（舔毛習(xí)慣），飲食正常。造模階段中：各實(shí)驗(yàn)兔精神萎靡，毛發(fā)發(fā)黃、枯燥、結(jié)塊（舔毛習(xí)慣發(fā)生改變），在第二次霧化結(jié)束后 2-3 天，大多數(shù)（17/27）模型兔出現(xiàn)流鼻清涕，甚至濃鼻涕。在第三、四霧化結(jié)束后，出現(xiàn) 5 只模型兔死亡。在完成 4 次豬胰蛋白酶霧化后，大多數(shù)（15/22）模型兔食量約減少造模前 1/3。2. 肺氣腫模型鑒定2.1．病理大體標(biāo)本（1）.新西蘭大白兔正常肺組織大體標(biāo)本：可見均一褐紅色，肺組織結(jié)構(gòu)完整，未有異常結(jié)構(gòu)出現(xiàn)；（2）.豬胰蛋白酶霧化建模后肺組織大體標(biāo)本：在兩肺葉表面可見數(shù)枚透亮肺泡，大小不等；同時(shí)可見雙肺上葉顏色灰白，肺葉密度稀疏，病變嚴(yán)重者蔓延范圍更廣（詳見圖 2.1、圖 2.2）。圖 2.1:新西蘭大白兔正常肺組織大體標(biāo)本 圖 2.2：新西蘭大白兔造模后大體標(biāo)本

圖 2.5 模型組（10X20） 圖 2.6 正常組（10X20）圖 2.3：模型對(duì)照組肺 HE 染色鏡下觀可見左上方出現(xiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺組織結(jié)構(gòu)輪廓糊不清；右下方肺組織結(jié)構(gòu)相對(duì)完整，出現(xiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；中間可見肺大泡結(jié)構(gòu)形成（1倍鏡下觀）；圖 2.4：正常組肺 HE 染色鏡下觀可見肺組織結(jié)構(gòu)輪廓清晰，未見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（1

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]缺氧環(huán)境下白細(xì)胞介素8通過(guò)Akt-STAT3通路提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自噬和增殖能力[J]. 沈雷,張善強(qiáng),張曉東,張彧婷,謝立平,姜楊,馬勇,李國(guó)峰.  生物工程學(xué)報(bào). 2016(10)
[2]丹參注射液對(duì)實(shí)驗(yàn)性兔肺氣腫阻抑作用的研究[J]. 郭蘭萍,王志剛,梁標(biāo),吳斌,周愛蓮,彭勃.  中國(guó)中藥雜志. 2005(15)



本文編號(hào)：3264310