目的:近年來干細(xì)胞移植治療是缺血性腦卒中較有潛力的治療手段,其中內(nèi)皮祖細(xì)胞（Endothelial Progenitor Cells,EPC）也是其中一種干細(xì)胞。EPC是骨髓組織、外周血或者臍帶血中,可分化為內(nèi)皮細(xì)胞的多潛能性細(xì)胞,在特定條件下可誘導(dǎo)分化成為血管內(nèi)皮細(xì)胞,具有新生血管和內(nèi)皮的作用。但動物實驗研究表明移植入的EPC很難在卒中后炎癥、幾乎不存在血管的區(qū)域存活,給臨床的應(yīng)用帶來很多困難。所以探索EPC如何定向遷移至缺血區(qū)以及怎樣向梗死區(qū)定向形成管腔樣結(jié)構(gòu)并與原有血管融合形成血管網(wǎng)絡(luò)可能會為尋找到更有效的治療方式提供新的思路。卒中后,損傷區(qū)域會釋放很多細(xì)胞因子,粘附因子等,其中CXC12與VEGF是其中較為重要的因子。研究表明CXCL12可以動員、募集EPC參與血管新生,而VEGF則是參與這一過程的重要因子。所以我們猜想CXC12與VEGF之間在EPC增殖,遷移和血管生成等過程中存在協(xié)同作用以后期探索兩者對缺血性卒中缺血區(qū)新生血管的定向新生和對神經(jīng)功能的修復(fù)作用。方法:1.用密度梯度離心法分離臍帶血中單個核細(xì)胞,接種在用人纖維連接蛋白（FN）包被過的培養(yǎng)瓶中,用內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人臍帶血來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞鑒定

合VEGF組中，隨著濃度的升高，EPC的增殖能力并沒有持續(xù)增高，反而在100 ng/ml時出現(xiàn)了下降，而且兩組細(xì)胞因子聯(lián)合對EPC促增殖能力的作用也沒有高于VEGF組，而是在 50 ng/ml 濃度時達(dá)到高峰，轉(zhuǎn)而出現(xiàn)下降。其中圖2B表示EPC的增殖能力的變化，A為各組對EPC增殖能力的影響大小。綜上結(jié)果，CXCL12和VEGF對EPC的增殖能力都有促進(jìn)，并且有濃度依賴性。而兩 組 因 子 聯(lián) 合 對 EPC 的 增 殖 作 用 并 不 是 較 強(qiáng) ， 反 而 有 最 佳 濃 度 配 比 。

組細(xì)胞因子的濃度都是500 ng/ml。這三組細(xì)胞因子分別填充條帶。對照組為FITC-BSA填充條帶。鋪上細(xì)胞30min后固定染色。紅色：細(xì)胞肌動蛋白。綠色：FITC的標(biāo)記的條帶，藍(lán)色：DAPI。如圖3所示，對照組的EPC肌動蛋白分布較自由，與帶有細(xì)胞因子的條帶位置也沒呈現(xiàn)出關(guān)系，相對于條帶分布的較散亂，而CXCL12組和CXCL12聯(lián)合VEGF組細(xì)胞的肌動蛋白并不像對照組那樣雜亂分布，反而向條帶方向趨化，形成黏著斑。而VEGF組同對照組一樣，肌動蛋白的分布沒有方向性的變化。為了證實上述結(jié)果，我們又設(shè)計實驗如下：在常規(guī)用FN和PDL包被的transwell系統(tǒng)中


本文編號：3260574