目的采用去卵巢法建立骨質(zhì)疏松模型,并研究模型中miR-150的表達(dá)情況及其影響骨質(zhì)疏松過程的可能機(jī)制。方法選取C57BL/6J采用卵巢摘除法建立骨質(zhì)疏松模型,micro CT檢測模型中骨質(zhì)情況,并分離BMSCs細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測BMSCs表面抗原檢測結(jié)果,MTT生長曲線和克隆形成情況鑒定BMSCs細(xì)胞增殖情況,RT-PCR檢測模型中miR-150、RUNX-2的表達(dá)情況,轉(zhuǎn)染miR-150 mimics和inhibitor后RT-PCR和Western Blot檢測細(xì)胞中RUNX-2的表達(dá)情況,成骨誘導(dǎo)及堿性磷酸酶（ALP）染色和茜紅素檢測不同處理組成骨能力變化情況。結(jié)果處理2個月后實驗組骨小梁明顯減少,稀疏,斷裂,骨含量下降;BMSCs克隆數(shù)及細(xì)胞增殖能力6 d、8 d后顯著降低,miR-150內(nèi)源性表達(dá)異常升高,兩組BMSCs表型CD29、CD44陽性,CD34、CD45陰性。模型建立成功后,實驗組中RUNX-2表達(dá)顯著降低,inhibitor抑制miR-150表達(dá)后,RUNX-2表達(dá)升高,miR-150 mimics組結(jié)果變化趨勢與miR-150 inhibitor組相反。與對... 

【文章來源】：黑龍江醫(yī)學(xué). 2019,43(10)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 實驗動物
    1.3 實驗方法
        1.3.1 實驗動物模型的建立：
        1.3.2 小鼠骨質(zhì)疏松模型鑒定：
        1.3.3 BMSCs細(xì)胞培養(yǎng)：
        1.3.4 BMSCs細(xì)胞的鑒定：
        1.3.5 BMSCs細(xì)胞增殖能力比較：
        1.3.6 RT-PCR檢測miR-150和RUNX-2的表達(dá)：
        1.3.7 Western Blot檢測蛋白表達(dá)：
        1.3.8 轉(zhuǎn)染對BMSCs成骨分化能力的影響：
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 microCT檢測結(jié)果分析
    2.2 化學(xué)染色結(jié)果分析
    2.3 BMSCs表面抗原檢測
    2.4 生長曲線比較
    2.5 克隆形成情況
    2.6 BMSCs中miR-150及RUNX-2表達(dá)檢測結(jié)果
    2.7 轉(zhuǎn)染對BMSCs成骨分化能力的影響結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MicroRNA-150通過靶向作用于RUNX2基因抑制骨肉瘤細(xì)胞系增殖[J]. 王龍飛,王衛(wèi)國,李勁松,陳世杰,詹瑞森.  中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(12)



本文編號：3230801