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酶消化法分離和培養(yǎng)人源原代跟腱干細(xì)胞

發(fā)布時間:2021-06-07 06:03
  目的建立人胎兒來源跟腱干細(xì)胞的分離方法,并對人源跟腱干細(xì)胞的生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定。方法采用酶消化法從胎兒跟腱組織中分離培養(yǎng)跟腱干細(xì)胞;通過光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);CCK-8法測定細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞術(shù)檢測表面抗原的表達(dá)情況;分別用成骨、成脂和成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)其分化,RT-qPCR鑒定分化標(biāo)記基因表達(dá);同時對跟腱干細(xì)胞蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測,探究其生物學(xué)特性。結(jié)果從胎兒來源的跟腱組織中提取的跟腱干細(xì)胞具有特征性的細(xì)胞形態(tài);在P3代以內(nèi),細(xì)胞增殖差異無統(tǒng)計學(xué)意義;細(xì)胞高表達(dá)CD44、CD90,不表達(dá)CD34、CD45;細(xì)胞通過誘導(dǎo)分化后成功向骨、脂肪及軟骨細(xì)胞分化,相關(guān)性基因表達(dá)升高;人源跟腱干細(xì)胞表達(dá)CollagenⅠ、CollagenⅢ、Tenascin-C、Scleraxis。結(jié)論酶消化法是分離、培養(yǎng)跟腱干細(xì)胞的有效辦法,跟腱干細(xì)胞表達(dá)與跟腱損傷修復(fù)有關(guān)的蛋白,為跟腱干細(xì)胞的鑒定及臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 

【文章來源】:生物骨科材料與臨床研究. 2020,17(01)

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

酶消化法分離和培養(yǎng)人源原代跟腱干細(xì)胞


P0代hTDSCs細(xì)胞融合約70%時光鏡下照片(×100);B.P0代TDSC細(xì)胞融合約90%時光鏡下照片(×100);C.P3代hTDSCs細(xì)胞融合約70%時光鏡下照片(×100)CCK-8法測定細(xì)胞增殖實驗證實:同一代的hTDSCs的2.3細(xì)胞多向分化潛能的鑒定

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Scleraxis慢病毒基因感染人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向肌腱細(xì)胞的定向分化[J]. 朱喜忠,劉子銘,吳術(shù)紅,熊華章,楊繼濱,李豫皖,尤奇,金瑛,左晨,劉毅.  中國組織工程研究. 2017(33)
[2]肌腱組織工程材料在肌腱損傷的應(yīng)用特點及前景[J]. 馮鵬飛,王繼宏,冀云濤,趙佳莉.  中國組織工程研究. 2017(18)
[3]BMP-14誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肌腱細(xì)胞分化的實驗研究[J]. 黃曉楠.  生物骨科材料與臨床研究. 2017(02)



本文編號:3216022

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