長鏈非編碼RNA-ZFAS1通過誘發(fā)心臟鈣超載誘導心肌梗死模型小鼠心肌細胞凋亡
發(fā)布時間:2021-05-25 14:11
目的研究長鏈非編碼RNA-ZFAS1(lncRNAZFAS1)對心肌梗死后心肌細胞凋亡的影響。方法在體水平,尾靜脈注射敲減lncRNA-ZFAS1的腺相關病毒(AAV9-shZFAS1)后建立敲減lncRNA-ZFAS1的心肌梗死模型小鼠。尾靜脈注射過表達lncRNA-ZFAS1的腺相關病毒(AAV9-ZFAS1),構建過表達ZFAS1的小鼠模型。利用Western印跡法檢測SERCA2a的表達以及凋亡相關蛋白的表達。細胞水平,通過轉(zhuǎn)染ZFAS1的過表達質(zhì)粒(pCDNA-ZFAS1)和敲減ZFAS1的siRNA(siZFAS1),構建過表達和敲減ZFAS1的細胞模型。亞細胞水平利用電鏡測定心臟組織和心肌細胞的線粒體腫脹情況;利用LIVE/DEAD試劑盒檢測心肌細胞的活力;利用JC-1染色測定心肌細胞的線粒體膜電位;利用流式細胞術和TUNEL染色檢測ZFAS1對心肌細胞凋亡的影響。此外,構建心臟組織特異性過表達ZFAS1的轉(zhuǎn)基因小鼠,利用optical mapping技術檢測轉(zhuǎn)基因小鼠心臟鈣穩(wěn)態(tài)情況,利用小動物心動超聲檢測轉(zhuǎn)基因小鼠的心臟功能。利用Western印跡法檢測SERCA2a的...
【文章來源】:中國藥理學會第十五次全國學術大會論文摘要中國藥理學會會議論文集
【文章頁數(shù)】:2 頁
本文編號:3205479
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