馬爾堡病毒是最早發(fā)現(xiàn)的絲狀病毒,能夠感染人和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物,引起急性出血熱癥狀,具有極高的傳染性和致死率,而且存在通過(guò)氣溶膠傳播的可能性,是一種潛在的生物戰(zhàn)劑,因此研發(fā)針對(duì)此病毒的疫苗勢(shì)在必行。馬爾堡病毒包膜糖蛋白是病毒的主要致病成分,在病毒感染、入侵細(xì)胞過(guò)程中發(fā)揮主要功能,目前正在研制的MARV疫苗大多基于該抗原設(shè)計(jì)。本研究以5型腺病毒作為載體,設(shè)計(jì)并制備純化了馬爾堡病毒病疫苗,隨后在小鼠和豚鼠模型上評(píng)價(jià)了它的免疫原性。在疫苗設(shè)計(jì)過(guò)程中,我們選擇致病性最強(qiáng)的馬爾堡病毒安哥拉株（2004-2005年流行于安哥拉地區(qū),致死率90%）作為研究對(duì)象,以其包膜糖蛋白為疫苗的靶標(biāo)抗原,對(duì)其基因組進(jìn)行密碼子優(yōu)化,合成優(yōu)化與未優(yōu)化的包膜糖蛋白基因,分別克隆至Ad Max腺病毒系統(tǒng)的穿梭質(zhì)粒pDC316上。通過(guò)共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞的方式使穿梭質(zhì)粒與AdMax腺病毒系統(tǒng)的骨架質(zhì)粒（pBHGlox-E1,3Cre）發(fā)生位點(diǎn)特異重組,包裝出能夠表達(dá)馬爾堡病毒包膜糖蛋白的復(fù)制缺陷型重組腺病毒疫苗候選株。對(duì)該疫苗候選株進(jìn)行擴(kuò)大化培養(yǎng)并純化,獲得一定的量以進(jìn)行后續(xù)的免疫學(xué)評(píng)價(jià)。細(xì)胞免疫反應(yīng)是機(jī)體針對(duì)外來(lái)抗原發(fā)揮... 

【文章來(lái)源】：軍事科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
摘要
Abstract
前言
第一章 重組腺病毒載體馬爾堡病毒病疫苗候選株的制備
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
第二章 馬爾堡病毒包膜糖蛋白CTL表位的篩選
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
第三章 重組腺病毒載體馬爾堡病毒病疫苗候選株的免疫學(xué)評(píng)價(jià)
    1.材料與方法
    2.結(jié)果
    3.討論
第四章 重組腺病毒載體馬爾堡病毒病疫苗候選株的保護(hù)性評(píng)價(jià)
    1.材料與方法
    2.結(jié)果
    3.討論
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
附錄1 主要溶液配制
附錄2 GP序列
作者在學(xué)期間取得的學(xué)術(shù)成果
主要簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào)：3197999