植酸在MPTP誘導(dǎo)的帕金森病小鼠模型中的抗炎機(jī)制研究
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【摘要】:目的:研究植酸(Phytic acid,PA)對(duì)1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)誘導(dǎo)的帕金森病小鼠模型中腦酪氨酸羥化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)表達(dá)、離子鈣接頭蛋白(iba1)含量、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(i NOS)活性、核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(NF-κB)以及磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(p-ERK)表達(dá)的影響。探討植酸通過(guò)抗炎作用對(duì)MPTP誘導(dǎo)的帕金森小鼠模型多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用機(jī)制。方法:C57BL6小鼠,隨機(jī)分為Control組、MPTP損傷組和PA治療組。旋轉(zhuǎn)法檢測(cè)帕金森小鼠模型的行為學(xué)變化,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)帕金森小鼠模型黑質(zhì)中多巴胺能神經(jīng)元損傷和小膠質(zhì)細(xì)胞激活標(biāo)志物iba1的表達(dá),實(shí)時(shí)定量熒光PCR(Q-PCR)法檢測(cè)i NOS活性,蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)NF-κB和p-ERK蛋白的表達(dá)。結(jié)果:與Control組相比,MPTP損傷組小鼠運(yùn)動(dòng)遲緩,黑質(zhì)中出現(xiàn)大量的神經(jīng)元缺失,小膠質(zhì)細(xì)胞大量激活,i NOS活性增加,NF-κB和p-ERK蛋白表達(dá)增多。而與MPTP損傷組相比,PA治療組小鼠運(yùn)動(dòng)機(jī)能得到改善,多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量增多,活化小膠質(zhì)細(xì)胞減少,i NOS活性減弱,NF-κB和p-ERK蛋白表達(dá)減少。結(jié)論:PA能抑制帕金森模型小鼠黑質(zhì)區(qū)域小膠質(zhì)細(xì)胞激活,降低帕金森模型小鼠黑質(zhì)區(qū)域NF-κB的核轉(zhuǎn)移、ERK1/2的磷酸化以及i NOS的活性,從而抑制帕金森模型小鼠黑質(zhì)區(qū)域的炎癥反應(yīng),最終抑制多巴胺能神經(jīng)元的損傷。
【關(guān)鍵詞】:植酸 帕金森病 炎癥 一氧化氮合酶 NF-κB ERK
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R742.5;R-332
【目錄】:
- 摘要2-3
- Abstract3-6
- 引言6-7
- 第1章 實(shí)驗(yàn)材料7-9
- 1.1 動(dòng)物7
- 1.2 主要藥品和試劑7-8
- 1.3 主要儀器設(shè)備8-9
- 第2章 實(shí)驗(yàn)方法9-13
- 2.1 帕金森小鼠模型制備9
- 2.2 行為學(xué)檢測(cè)9
- 2.3 組織處理與灌注9
- 2.4 免疫組織化學(xué)9-10
- 2.5 RNA提取及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Q-PCR)10
- 2.5.1 RNA的提取10
- 2.5.2 RT-PCR10
- 2.5.3 Q-PCR10
- 2.6 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶活性檢測(cè)10-11
- 2.7 蛋白免疫印跡(western blot)分析11-12
- 2.7.1 蛋白樣品制備11
- 2.7.2 配置SDS-PAGE凝膠11
- 2.7.3 上樣及SDS-PAGE凝膠電泳11
- 2.7.4 轉(zhuǎn)膜11
- 2.7.5 封閉11-12
- 2.7.6 孵育抗體12
- 2.7.7 顯色12
- 2.8 統(tǒng)計(jì)分析12-13
- 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果13-17
- 3.1 植酸對(duì)帕金森小鼠模型行為學(xué)的影響13
- 3.2 植酸對(duì)黑質(zhì)中多巴胺能神經(jīng)元的影響13-14
- 3.3 植酸對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響14-15
- 3.4 植酸對(duì)一氧化氮合酶活性的影響15
- 3.5 植酸對(duì)NF-κB和p-ERK1/2 蛋白表達(dá)的影響15-17
- 第4章 討論17-19
- 結(jié)論19-20
- 參考文獻(xiàn)20-24
- 綜述24-41
- 摘要24
- 1 帕金森疾病中存在膠質(zhì)細(xì)胞激活和炎癥反應(yīng)24-27
- 2 神經(jīng)炎癥在帕金森病中的作用27-28
- 3 膠質(zhì)細(xì)胞在帕金森病中的作用28-29
- 4 抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活性對(duì)多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用29-30
- 5 抑制炎癥是一種有前景的治療帕金森病的方法30-31
- 6 結(jié)語(yǔ)31-32
- 綜述的參考文獻(xiàn)32-41
- 攻讀學(xué)位期間的研究成果41-42
- 致謝42-43
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本文編號(hào):295502
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