目的利用相對定量分析鐵調(diào)節(jié)蛋白基因在淡色庫蚊敏感和抗氯氰菊酯品系體內(nèi)的表達(dá)量。方法設(shè)計(jì)引物、提取RNA、普通PCR、純化測序、序列比對、熒光定量PCR,采用F檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)對敏感和抗性品系淡色庫蚊體內(nèi)鐵調(diào)節(jié)蛋白基因表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果將擴(kuò)增的淡色庫蚊鐵調(diào)節(jié)蛋白基因片段進(jìn)行序列比對,與致倦庫蚊相似性較高。熒光定量PCR數(shù)據(jù)分析,淡色庫蚊敏感品系(IRP_敏)和抗性品系(IRP_抗)鐵調(diào)節(jié)蛋白Ct平均值分別為15.17和18.37,內(nèi)參基因(β_敏和β_抗)Ct平均值分別為20.49和19.06,t檢驗(yàn)顯示兩樣本鐵調(diào)節(jié)蛋白基因表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=9.52,P0.001),鐵調(diào)節(jié)蛋白基因在淡色庫蚊抗性品系中的表達(dá)量降低。結(jié)論淡色庫蚊鐵調(diào)節(jié)蛋白可能參與了抗性機(jī)制。
【部分圖文】：

淡色庫蚊RNA電泳結(jié)果

淡色庫蚊鐵調(diào)節(jié)蛋白部分基因擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果

利用軟件MEGA-6進(jìn)行堿基和氨基酸序列的對比(圖3),所得基因片段與致倦庫蚊堿基序列相似性最高。通過MEGA-6軟件進(jìn)行聚類分析,利用最大似然法(ML)構(gòu)建生物進(jìn)化樹(圖4),所得基因片段與致倦庫蚊相似性最高,相似性比對結(jié)果說明,該基因?yàn)榈珟煳描F調(diào)節(jié)蛋白的可能性極大。圖4 不同物種鐵調(diào)節(jié)蛋白基因序列聚類分析
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1 王新國,王懷位,甄天民,江洪濤,孫傳紅,趙玉強(qiáng),程鵬,王海防;淡色庫蚊三種抗性品系抗性發(fā)展與乙酰膽堿酯酶相關(guān)性的研究[J];中國媒介生物學(xué)及控制雜志;2005年04期

2 王新國,甄天民,劉鳳梅,李士根,王懷位,趙玉強(qiáng),孫傳紅;淡色庫蚊抗性品系對化學(xué)殺蟲劑交互抗性的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國媒介生物學(xué)及控制雜志;1999年01期

本文編號：2866393