【摘要】：小分子熱休克蛋白(small heat shock proteins, sHSPs)是熱休克蛋白的重要組成部分。在各種應激狀態(tài)的刺激下,它們在組織中表達迅速增加,參與對組織的保護作用從而防止組織損傷。小分子熱休克蛋白,α-晶體蛋白,是晶狀體中的結構蛋白,存在兩種不同的亞基,即αA-和αB-晶體蛋白。 晶狀體上皮細胞的凋亡已被揭示為非遺傳性白內障病理機制之一,研究表明氧化應激壓力是晶狀體上皮廣泛應對的一種環(huán)境壓力并證明是白內障形成的重要因素。α-晶體蛋白在對抗外界刺激所引起的細胞凋亡中有著重要的作用�；趯Ζ�-晶體蛋白生物功能的認識,我們實驗室以及其他研究實驗室的工作都表明α-晶體蛋白可以通過調節(jié)細胞凋亡途徑中兩個重要的家族：Caspase和Bcl-2家族來抑制細胞凋亡,而且還有研究表明aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白在特定的應激狀態(tài)下表現(xiàn)了不同的抗凋亡機制。比如。在由紫外線和氧化應激壓力導致的細胞凋亡過程中,aA-晶體蛋白是通過調節(jié)激活AKT信號通路來抑制細胞凋亡,而aB-晶體蛋白則是通過負性調節(jié)MAPK信號通路來抑制細胞凋亡。雖然已有研究表明aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠調節(jié)Caspase和Bcl-2家族的成員,但是其具體的分子機制,尤其體內調節(jié)機制并未被詳細闡述。 本實驗的首要目的就是研究α-晶體蛋白與Caspase-3和Bax之間的相互作用對小鼠眼睛發(fā)育的影響。其主要研究方法和結果如下： (1)首先本實驗小組首先通過表面等離子共振技術分析得知aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠和Caspase-3蛋白相互作用并顯示出不同程度的作用強度； (2)運用免疫組織化學染色技術,通過對小鼠不同胚胎時期的眼睛組織切片進行熒光染色,可得知aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白與Caspase-3在小鼠不同胚胎時期都有表達,并且aA-晶體蛋白和Caspase-3以及aB-晶體蛋白與Caspase-3都存在共定位表達,但是兩者共定位的胚胎時期不同,而且表達量均有顯著差異； (3)通過酵母雙雜交系統(tǒng),初步確定aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠與Bax在體外結合,并且顯示了對Bax結合的不同的親和性； (4)運用免疫組織化學染色技術,通過對小鼠不同胚胎時期的眼睛組織切片進行熒光染色,可得知aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白與Bax在小鼠不同胚胎時期都有表達,并且aA-晶體蛋白和Bax以及aB-晶體蛋白與Bax都有共定位表達,但兩者在小鼠不同胚胎時期的表達量不同； (5)以新生小鼠的晶狀體為材料,通過免疫共沉淀以及Western Blot技術分析進一步證實了在小鼠的晶狀體中aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白均可與Caspase-3和Bax在小鼠晶狀體內形成相互作用的蛋白復合物。 本研究首次提供體內和體外證據(jù)表明aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠直接與Caspase-3和Bax結合形成相互作用的蛋白復合物,并通過對Caspase-3和Bax活性的調節(jié),保護小鼠眼睛晶狀體的正常發(fā)育。
【學位授予單位】：湖南師范大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R339.14;Q51

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王樹茂;蘭道亮;陳亞冰;林寶山;李鍵;;牦牛HSPA1A和HSPA2基因組織分布的檢測[J];動物醫(yī)學進展;2013年12期

2 王俊利;元輝雄;韋貴將;王春芳;羅春英;韋葉生;黃照權;;我國廣西人群CRYAB基因rs3212227與rs6894567遺傳多態(tài)性研究[J];重慶醫(yī)學;2013年31期

3 練冬梅;王會芳;陳綿才;;植物寄生線蟲Hsp70研究進展[J];基因組學與應用生物學;2013年06期

4 ;Cloning of murine BRI3 gene and study on its function for inducing cell death[J];Chinese Science Bulletin;2002年05期

5 林麗珠,喻紅,應明耀,唐炯,周煒,趙壽元,李昌本;小鼠BRI3基因的克隆及其誘導細胞死亡的作用[J];科學通報;2001年18期

6 徐勤;高珊;劉吉娜;;喉鱗狀細胞癌組織中Caspase-3的表達及其與bFGF和微血管密度的關系[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2013年19期

7 李巧云;張海華;游仁芳;;保護素D1對大鼠全腦缺血再灌注損傷海馬Caspase-3表達及神經(jīng)元凋亡的影響[J];南昌大學學報(醫(yī)學版);2013年10期

8 張元新;葛雅琨;;水飛薊賓對MCF-7和SK-OV-3誘導凋亡作用的不同敏感性[J];吉林化工學院學報;2014年01期

9 陳連香;肖鎮(zhèn);王威;;辛伐他丁對淋巴瘤CA46細胞凋亡的影響及機制[J];海南醫(yī)學院學報;2014年02期

10 夏歡;張其中;;近江牡蠣(Crassostrea hongkongensis)熱休克蛋白70對壬基酚的響應[J];生態(tài)與農(nóng)村環(huán)境學報;2014年02期

相關博士學位論文 前10條

1 劉冬梅;玻璃體切割術后并發(fā)性白內障發(fā)病機制的實驗研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2010年

2 熊濤;人涎腺腫瘤的生長、轉移及其凋亡的光學成像[D];華中科技大學;2005年

3 廖旭東;壓力負荷誘導心肌細胞凋亡的機制[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2003年

4 侍作亮;腫瘤壞死因子信號傳導及其旁路在小鼠肝癌細胞凋亡過程中作用及其機制的研究[D];華中科技大學;2006年

5 曾憲東;桿狀病毒AcMNPViap基因功能及分子機理的研究[D];中國科學院研究生院（武漢病毒研究所）;2007年

6 王璞;神經(jīng)節(jié)苷脂GM3通過Arhgdib和TNFα調節(jié)細胞的表現(xiàn)型[D];沈陽藥科大學;2007年

7 謝昌傳;基礎穩(wěn)態(tài)重鏈鐵蛋白和可誘導重鏈鐵蛋白在腫瘤壞死因子誘導L929細胞死亡中的不同作用[D];廈門大學;2007年

8 張娜;TNF-α誘導的caspase非依賴性死亡需要Rip3介導的胞內ROS積聚[D];廈門大學;2008年

9 劉梅;miR-17-92在食管癌中作用機制的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2009年

10 趙立杰;小白菊內酯對胃癌細胞增殖抑制和誘導凋亡作用的研究[D];中國醫(yī)科大學;2008年

相關碩士學位論文 前10條

1 馮偉燕;Vasostatin治療糖尿病視網(wǎng)膜�。―R）的初步研究[D];南京醫(yī)科大學;2009年

2 孫振民;腸道病毒71型拮抗TLR3信號通路及其誘導細胞凋亡的機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

3 喬京京;rhTNF-α衍生物3a治療小鼠移植性肝癌的實驗研究[D];大連醫(yī)科大學;2003年

4 馬湘;人LIGHT基因的克隆及其在HepG_2細胞中的表達[D];青島大學;2006年

5 盧先鋒;新生大鼠缺血缺氧性腦損傷HSP70的合成及與細胞凋亡的關系[D];山西醫(yī)科大學;2006年

6 王琪;LIGHT誘導DC成熟過程中SOCS1、SOCS3的表達及其相互作用的初步研究[D];四川大學;2006年

7 于少娟;急性心肌梗死早期血清sTRAIL與IL-10的變化及相關性研究[D];吉林大學;2007年

8 肖麗;rhGH對LPS誘導的巨噬細胞凋亡和NF-κB的影響[D];中南大學;2007年

9 陳迎迎;去整合素Kistrin對人晶狀體上皮細胞株黏附、增殖的影響[D];廣西醫(yī)科大學;2007年

10 賈蒙嵐;KH902溶劑對人晶狀體上皮細胞的作用[D];四川大學;2007年

本文編號：2790996