【摘要】：背景:到目前為止關(guān)于胰腺干細(xì)胞能建株甚至建系的報(bào)道極少,而且建系率較低,純化出胰腺干細(xì)胞仍有一定的困難。目的:探索一套更合理、更有效的胰腺干細(xì)胞在體外分離及連續(xù)傳代的技術(shù)和方法,使其有望能建立成細(xì)胞株甚至細(xì)胞系,為后續(xù)胰腺干細(xì)胞治療糖尿病的相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。方法:實(shí)驗(yàn)首先通過Percoll不連續(xù)密度梯度離心的方法,使小鼠胰腺的內(nèi)、外分泌部的細(xì)胞分布在不同的密度界面,然后獲得來(lái)源于胰腺內(nèi)分泌部即胰島的干細(xì)胞,使用經(jīng)絲裂霉素C作用的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞作為飼養(yǎng)層,在飼養(yǎng)層條件下對(duì)來(lái)源于胰島的胰腺干細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)傳代,使其連續(xù)傳至第30代,并通過生長(zhǎng)特性檢測(cè)、形態(tài)學(xué)觀察、相關(guān)分子標(biāo)志物鑒定以及分化特性鑒定等一系列的檢測(cè)完善對(duì)該胰島來(lái)源的胰腺干細(xì)胞株檢測(cè)和鑒定。結(jié)果與結(jié)論:在連續(xù)傳代過程中胰腺干細(xì)胞均體現(xiàn)了活躍的分裂增殖能力,并保持典型的干細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征、表達(dá)胰腺干細(xì)胞分子標(biāo)志物Nestin,經(jīng)誘導(dǎo)分化后表達(dá)胰島素基因,體現(xiàn)出了分化潛能。結(jié)果說(shuō)明,實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)層條件下成功建立并鑒定了昆明小鼠胰島來(lái)源的胰腺干細(xì)胞株。

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