本文關(guān)鍵詞：DENV-2感染小鼠ANA-1巨噬細(xì)胞補(bǔ)體mRNA動(dòng)態(tài)和細(xì)胞極化的初探，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討DENV-2對(duì)小鼠ANA-1巨噬細(xì)胞胞內(nèi)補(bǔ)體相關(guān)組分mRNA和細(xì)胞極化動(dòng)態(tài)的影響。方法：用C6/36細(xì)胞增殖DENV-2, RT-PCR鑒定病毒,TCID50滴定病毒效價(jià)。分別以LPS/IL-4體外刺激小鼠ANA-1細(xì)胞3h、8h、12h及24h,Real-time PCR法檢測IL-1β、CCL2、Arg-1細(xì)胞極化指標(biāo)的變化,檢測胞內(nèi)C3、CfB、CRIg、Clq補(bǔ)體成分mRNA的動(dòng)態(tài)。用DENV-2感染M0/M2極化的ANA-1巨噬細(xì)胞,Real-time PCR檢測細(xì)胞的極化指標(biāo)、NS1基因和Mavs抗病毒基因的表達(dá),以及胞內(nèi)補(bǔ)體C3、CRIg、Clq mRNA的動(dòng)態(tài)。結(jié)果：1)細(xì)胞極化后補(bǔ)體mRNA動(dòng)態(tài)：刺激3h后LPS組IL-1β、 CCL2 mRNA表達(dá)上調(diào),12h達(dá)高峰；IL-4組中以Arg-1 mRNA表達(dá)上調(diào)顯著,于24h達(dá)高峰,提示LPS組細(xì)胞向MI方向極化,IL-4組向M2方向極化。兩極化組的相應(yīng)補(bǔ)體組分均表現(xiàn)為不同程度的上調(diào),其中：①C1q、C3在ANA-1向M2極化8h后上調(diào)顯著,12h時(shí)達(dá)高峰(2-△△ct分別為94.9±12.9和11.34±2.4)；②CfB因子在M1極化組中上調(diào)顯著,12h表達(dá)上調(diào)達(dá)高峰(2-△△ct為61.4±6.2)；③CRIg在兩組中均在24h時(shí)表達(dá)上調(diào)且具有顯著性差異(P0.05)。2)DENV-2感染M0/M2狀態(tài)的ANA-I細(xì)胞后補(bǔ)體mRNA動(dòng)態(tài)：①感染后C1qmRNA表達(dá)均受抑制,且M2感染組比M0感染組C1q表達(dá)均較高(差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)；②3h時(shí)M2感染組C3mRNA表達(dá)受抑制,12h時(shí)上調(diào)2-△△ct為5.08±2.25。與M0感染組相比,12h和24h時(shí)兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；③除12h檢測點(diǎn)外,DENV-2感染后CRIg表達(dá)均上調(diào)或在正常水平。④DENV-2感染后M2細(xì)胞CfB基因表達(dá)均被下調(diào),但與感染M0組比較兩組無明顯差異。3) DENV-2感染后M0/M2狀態(tài)的ANA-1細(xì)胞后細(xì)胞極化的動(dòng)態(tài)：DENV-2感染M0細(xì)胞后IL-1β、CCL2和Arg-1表達(dá)均受抑制,Arg-I基因于24h時(shí)恢復(fù)正常。DENV感染逆轉(zhuǎn)M2細(xì)胞Arg-I基因的表達(dá)。4)感染后胞內(nèi)NS1、Mavs mRNA的動(dòng)態(tài)：24h內(nèi)各感染組間NS1和Mavs基因的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：1)不同極化ANA-1細(xì)胞表達(dá)補(bǔ)體成分mRNA不同：M1極化細(xì)胞較高表達(dá)CfB,M2極化細(xì)胞高表達(dá)C1q、C3和CRIg。2) DENV-2感染不同極化狀態(tài)的細(xì)胞后補(bǔ)體mRNA表達(dá)的差異：DENV-2下調(diào)M2型ANA-1細(xì)胞C1q和C3的表達(dá),而CRIg保持正常水平或表達(dá)上調(diào)；與感染的M0細(xì)胞相比,C1q、CRIg在M2感染組相對(duì)上調(diào)。3)DENV-2可逆轉(zhuǎn)或延遲感染細(xì)胞的極化。4)感染后胞內(nèi)補(bǔ)體mRNA的動(dòng)態(tài)可能與病毒增殖、細(xì)胞抗病毒反應(yīng)Mavs的變化無關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：DENV-2 巨噬細(xì)胞ANA-1 補(bǔ)體 NS1 Mavs
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 略縮詞表9-10
• 引言10-11
• 材料與方法11-19
• 結(jié)果19-33
• 討論33-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 綜述44-60
• 參考文獻(xiàn)53-60
• 作者簡歷60-61
• 附件61-63
• 致謝63-64
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集64

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本文編號(hào)：251715